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yd1129588552

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样查询该基因是否有表达?如何验证是引物问题还是样品问题亦或是该基因根本不表达 已有1人参与

例如我要查询肝脏中是否有UCP1的表达,或者在肾周脂肪、皮下脂肪是否有UCP1的表达?如果做实验的话要先验证是否有该基因的表达,我是直接设计引物做了该基因的PCR,溶解曲线并不单一,也不知道到底是引物问题还是样品问题亦或是该基因根本不表达?此时该做什么呢?@biostar2009@wizardfan
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star013

新虫 (知名作家)


2楼2018-05-12 07:22:50
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memorize1991

木虫 (正式写手)

3楼2018-05-12 15:32:41
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yd1129588552

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by memorize1991 at 2018-05-12 15:32:41
取各组织做western吧

western没有带,就证明说他不表达这个基因吗?
4楼2018-05-12 22:02:35
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yd1129588552

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2018-05-12 07:22:50
我们可以做基因表达检测

基因表达检测不是转录水平上的表达检测:RT-PCR、荧光定量PCR,或是在蛋白水平上的表达检测Western杂交吗?还有其他检测吗?
5楼2018-05-12 22:02:54
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memorize1991

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yd1129588552: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2018-05-14 14:11:23
引用回帖:
4楼: Originally posted by yd1129588552 at 2018-05-12 22:02:35
western没有带,就证明说他不表达这个基因吗?...

western elisa都行,蛋白水平检测是最直观最有效的。QRT可以在转录组水平检测,但最强有力的证据就是western。你也可以做转录组测序,或者提RNA反转录后用相应引物做普通的pcr,看看这个基因是否表达。

发自小木虫Android客户端
6楼2018-05-13 08:36:13
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yd1129588552

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by memorize1991 at 2018-05-13 08:36:13
western elisa都行,蛋白水平检测是最直观最有效的。QRT可以在转录组水平检测,但最强有力的证据就是western。你也可以做转录组测序,或者提RNA反转录后用相应引物做普通的pcr,看看这个基因是否表达。
...

好的,~~谢谢啦
7楼2018-05-14 14:11:42
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