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新虫 (初入文坛)

[交流] 浅析胎牛血清的八项技术指标! 已有2人参与

Cellmax俱乐部
关于胎牛血清的技术指标,各个品牌大同小异,但是也不排除为了宣传卖点夸大其词的现象出现,作为具有多年血清销售经验的行业人士,为各位就胎牛血清的技术指标做以下分析。
一、内毒素
根据《中国药典》、《美国药典》,血清内毒素含量≤10EU/ml。内毒素是细菌破裂后的细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前市场上有些胎牛血清品牌以内毒素含量为优点,列出内毒素含量≤5EU/ml或≤3EU/ml,赢得客户的眼球。其实事实并非如此,如Gibco的澳洲、新西兰胎牛血清内毒素≤10EU/ml;HyClone的澳洲胎牛血清内毒素≤5EU/ml,而南美胎牛血清内毒素<25EU/ml,血清质量也未见影响,可见内毒素含量偏高不影响血清质量,除非含量极高,预示着已经污染。
二、血红蛋白含量
胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
三、总蛋白含量
胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。
四、pH
根据药典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间,并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。
五、渗透压
胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法,渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg):280-360之间
六、微生物
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体等。随着各个品牌血清生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。如CellMax胎牛血清,3次0.1um无菌过滤以后,又通过培养法和DNA染色法进行支原体检测,结果均呈现阴性才会放行销售。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大,不过对于工业生产的客户来说,往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。
七、免疫球蛋白
免疫球蛋白的数值能完全体现出采血时的牛龄情况,新生牛血清容易产生IgM,IgG的含量也偏高;胎牛血清不含IgM,IgG的含量也较低。可以通过血清蛋白电泳SDS检测。
低IgG的胎牛血清推荐适用于抗体生产及相关领域。
八、抗生素
不管是国产还是进口胎牛血清都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)
其实,国内和国外的胎牛血清中都含有不同程度的抗生素
如果您认为国外抗生素使用严格,用量也很少,可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低,这有考证吗?但是您知道为什么进口的胎牛血清要做成透析型的胎牛血清吗?因为透析也能去除胎牛血清中抗生素及其它内源分子
国内抗生素的滥用已成为普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这也是国产血清质量差的根本原因。其实,我们知道原有的国产胎牛血清大多数为新生牛血清,兰州民海生物工程有限公司为生产真正意义上的中国品牌胎牛血清,通过不懈努力,在国内找到了适合生产胎牛血清的仅存的一处天然牧场,在原HyClone国内生产线加工生产CellMax胎牛血清。您不妨可以试一试。
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专注于细胞培养,欢迎大家来交流!
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dongmay

新虫 (初入文坛)

支原体也要检测的 gendx
2楼2018-08-06 17:55:49
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pansums

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
“内毒素含量偏高不影响血清质量”

这个完全不能认同!
内毒素(LPS)对细胞会产生实实在在的影响,LPS会激活细胞的炎症反应等,这方面的文献很多。若真的没影响,那些大牌血清生产公司会傻不拉几的去费大功夫去降低内毒素含量?说内毒含量不影响血清质量的,往往是生产商自己没能力将血清的内毒素降低到低水平。

“HyClone南美胎牛血清内毒素<25EU/ml”,你这指的是在国内加工、2014年已经停产的SV30087;事实上HyClone的南美血清在国外一直加工生产,货号是SV30160,内毒素含量≤10EU/ml,实际内毒素含量几乎都在1EU/ml以下,SV30160供应欧洲和部分亚洲地区,只是国内不让进口;这款质量好,价格相对低,性价比极高。

所有高品质的血清,虽然写着内毒素低于5或10或20EU/ml,但实际含量基本上都是在1EU/ml以下,甚至是0.2EU/ml以下的;普通牌子的就可能比较高,如Gibco南美血清,内毒素控制的就比较差,常常是5EU/ml以上,高的能达到20EU/ml左右,比Hyclone的南美血清质量差一些。当然,Gibco的高端牌子的内毒素实际含量是极低的,比要求的标准低很多;这点,Hyclone也是。

内毒素肯定能对细胞产生不好的影响,只是有些细胞耐受性不错,但有些就很敏感。不要说内毒素含量偏高不影响血清质量,这么说要么是故意误导,要么是在说外行话。
3楼2018-08-20 21:43:36
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