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Demon黄

银虫 (小有名气)

[求助] 提取的RNA总是一条带,请问是怎么回事已有2人参与

提取螨虫RNA,只提出了一条带,枪头还有其他耗材和试剂都是提RNA专用的,在提取过程中操作也很小心。测过OD比值为2.2.而且将其做反转录,PCR也能扩增出结果。这是什么原因?还请大神们帮帮忙

提取的RNA总是一条带,请问是怎么回事
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

浓度过高,没跑开~稀释后再跑,并且延长电泳时间

发自小木虫Android客户端
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
2楼2018-05-11 10:23:36
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woshishui916

木虫 (著名写手)

★ ★
渊博震天: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-09-04 12:11:31
不是没跑开,是降解了噢。

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-11 14:02:02
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woshishui916

木虫 (著名写手)

4楼2018-05-11 14:02:17
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab

你好
5楼2018-05-11 18:21:27
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab

你好
6楼2018-05-11 18:22:10
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Aimee6

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by Demon黄 at 2018-05-11 09:14:03
提取螨虫RNA,只提出了一条带,枪头还有其他耗材和试剂都是提RNA专用的,在提取过程中操作也很小心。测过OD比值为2.2.而且将其做反转录,PCR也能扩增出结果。这是什么原因?还请大神们帮帮忙

RnA  2018-4-13.JPG...

昆虫海洋软体动物等一些低等的RNA变性之后检测有时候是会跑出一条带,是因为70度变性过程中28S会分为a和b(不会打阿尔法和贝塔)两个亚基,这两个亚基和18SrRNA相似,所以是和18S一起被检测出来的,而不能检测出28S吧

发自小木虫IOS客户端
7楼2018-05-11 22:07:01
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Demon黄

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Aimee6 at 2018-05-11 22:07:01
昆虫海洋软体动物等一些低等的RNA变性之后检测有时候是会跑出一条带,是因为70度变性过程中28S会分为a和b(不会打阿尔法和贝塔)两个亚基,这两个亚基和18SrRNA相似,所以是和18S一起被检测出来的,而不能检测出28 ...

谢谢啦,不过我这个是节肢动物,应该和软体动物不一样
8楼2018-05-12 10:48:42
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Demon黄

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1006641214 at 2018-05-11 18:22:10
做好抑制RNA酶的工作

嗯嗯,好的,谢谢
9楼2018-05-12 10:49:07
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Demon黄

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1006641214 at 2018-05-11 18:21:27
降解了

还想请问以下,如果RNA降解了,反转录还可以转录出cDNA吗?
10楼2018-05-12 10:50:29
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