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钱兰兰

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于WB一抗问题

因为WB我打算一天之内做完,做的actin,所以想的是一抗放4度孵育大概8个小时够么,因为我们实验室一抗不让放室温,说很容易失活

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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

什么规矩啊,一抗放室温我们每次孵育1.5h,就这样一抗也可以反复用2-3次,根本没问题,抗体哪有那么脆弱。

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2楼2018-05-11 08:37:41
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

我们实验室就是一天出结果,从跑胶到曝光,没问题的。

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3楼2018-05-11 08:38:47
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yh19870423

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-05-11 08:38:47
我们实验室就是一天出结果,从跑胶到曝光,没问题的。

你们是怎么做的啊?一天可以搞定?
我们实验室也有一些可以一天出结果,预制胶,封闭一抗二抗一起孵育,但是做内参还行,做其他的抗体就效果不太好,可以说说你们是怎么做的吗?
4楼2018-05-12 10:19:38
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yh19870423

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-05-11 08:38:47
我们实验室就是一天出结果,从跑胶到曝光,没问题的。

能说一下你们是怎么做的吗?我现在是每个周六都要加班,实在是不想加班啊,能指导下吗?怎么样才能在一天内从配胶到最后显色都能很好地完成呢?
5楼2018-05-12 10:23:35
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

早上8点半开始电泳,一个小时基本电泳完成,湿转一个半小时到两个小时结束,封闭一个小时,一抗室温孵育2小时,TBST洗涤三次20分钟,二抗室温孵育1小时,TBST洗涤20分钟,曝光。

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6楼2018-05-12 22:13:09
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