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绿茶的懵懂

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关于大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的活化和抑菌试验求助
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本人要以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为目标菌做抑菌试验。有几个问题想请教大家,希望得到大家的帮助
1、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌菌种活化以后4℃冷藏,两个星期内都是可以随时用的,过了这个时间点就必须要重新活化?是因为放置时间太长,菌活力不够?时间可不可以延长一点,我4.15活化的目标菌,到现在有20天了,能不能再用?
2.网查大多数大肠杆菌需要摇床培养,它和静止培养的差异在哪?是摇床培养活化时间更短吗?
3.以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为目标菌做抑菌试验,需要对其菌活力进行确定吗?还是直接37℃培养,12h或者更短时间内培养基浑浊,就可以使用,不需要确定它的菌活力到底有多少
在这里,先提前谢谢提供帮助的大神

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