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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因全长克隆
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xmchh123456

新虫 (小有名气)

[求助] 基因全长克隆

基因通过分段克隆出了基因的全长，已包含ORF框在内，但是该基因克出的全长比对后发现和其他物种的全长差别很大，3'端比其他物种少将近2000多bp，但编码序列大小一样大，请问各位大咖，是什么原因呢？该如何去克隆才得到和其他物种相差不大的全长序列？

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1楼 2018-04-30 22:13:37
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wxm0212

新虫 (正式写手)
poly结构吗

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2楼2018-04-30 22:25:38
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xmchh123456

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wxm0212 at 2018-04-30 22:25:38
poly结构吗

后面有十多个polyA尾，但是就3`端的序列比其他物种要少很多，不知道是为什么

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3楼2018-04-30 22:32:53
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wxm0212

新虫 (正式写手)
可以重新设计引物，验证一下，是微卫星结构吗

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4楼2018-04-30 22:38:13
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xmchh123456

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wxm0212 at 2018-04-30 22:38:13
可以重新设计引物，验证一下，是微卫星结构吗

是引物问题吗？克隆3`端有什么好的方法吗？什么是微卫星结构？

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5楼2018-04-30 22:46:41
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wxm0212

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-03 07:57:41
可以设计3端的通用序列然后进行扩增，看看你的目的条带跟其他的差距在哪

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

xmchh123456
6楼2018-05-02 12:26:05
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xmchh123456

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by wxm0212 at 2018-05-02 12:26:05
可以设计3端的通用序列然后进行扩增，看看你的目的条带跟其他的差距在哪

我试一下，谢谢

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7楼2018-05-02 20:24:39
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