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playboy723

金虫 (正式写手)

[交流] 关于质粒复制的问题

各位虫友  请教一个问题  我把PCR3.1质粒转染进入真核细胞中稳定筛选阳性克隆,  我现在想知道的是质粒在真核细胞中能够复制吗   我知道质粒在大肠杆菌中能够复制  但在真核细胞中就不知道了    有知道的吗  希望不吝赐教
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塞外雨

金虫 (著名写手)

呵呵呵我知道有些能在酵母中表达.不清楚你的哦,既然都转进去了,那就检测一下产物呗
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
2楼2009-03-21 18:47:53
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

酵母是真核的吧,我转过酵母,都是可以复制的
3楼2009-03-22 09:53:52
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

我做过的是重组到酵母基因组上了,能随基因组一起复制,但是细胞内没有单独的环状或线性质粒
4楼2009-03-22 13:00:15
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

与真核细胞的基因组整合
但是整合的话有不同的形式
加药筛完之后还得进一步鉴定,如southern
5楼2009-03-22 13:10:23
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playboy723

金虫 (正式写手)

我的意思是质粒在没有整合到基因组上时能否自行在真核细胞中复制   是不是如果有SV40就能在真核细胞中自主复制?
6楼2009-03-23 12:20:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

整合上去了,自然就随着细胞分裂而复制
当然也要有相应的元件(或者说插入时元件完整)
7楼2009-03-23 14:06:42
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