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梧桐眼

金虫 (著名写手)

[交流] 求助:关于RNA提取有些不理解的东东!

TristCl                     EDTA                    NaCl
RNA   100mmol/L              2mmol/L               200mmol/L
DNA   50mmol/L               50mmol/L             1000mmol/L

以上是我看到的提取核酸的缓冲液配方,不管是DNA还是RNA缓冲液只有浓度有区别,还有他们都用的是SDS法!

我不理解的是两种缓冲液相同成分不同浓度的区别是啥嘞!
原理上的问题!

那位师兄给我叫叫啊!
            
                                         梧桐眼上

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-7 at 20:26 ]
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wangtengxu

木虫 (正式写手)

现在都用试剂盒了
不过帮你顶
弱弱的问一句:你的配方从哪里来的?
想和有趣的人一起做有趣的事。
2楼2009-03-21 23:10:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

更加应该强调的是pH值的区别……
可以查查资料
提示:水饱和酚,Tris饱和酚
3楼2009-03-21 23:22:52
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

RNA提时用的是水饱和酚,DNA用Tris饱和酚
4楼2009-03-22 09:50:30
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梧桐眼

金虫 (著名写手)

楼上的提示很对我很有帮助谢谢 !
5楼2009-03-22 11:52:12
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梧桐眼

金虫 (著名写手)

水饱和酚又叫水平衡酚。水饱和酚的PH小于7,通常与异硫氢酸胍一起使用,用于细胞RNA的提取,这样DNA在酚相,RNA在水相。两者就分开了。

刚才查到的!在此感谢3楼! 你的提醒让我少走了弯路!感谢!
6楼2009-03-22 14:53:27
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luckyyan

新虫 (小有名气)

EDTA可以螯合二价金属离子Ca My等。这样可以抑制DNA酶的活性。所以在DNA buffer 中 EDTA 浓度要大得多。可能是这个原因吧。
7楼2009-03-23 16:02:51
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