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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 梯度洗脱求助大神
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hkhk哈哈

木虫 (小有名气)

[求助] 梯度洗脱求助大神 已有1人参与

本人最近跑液相，样品用甲醇溶解，C18柱，纯甲醇为流动相，跑出来有两种物质的保留时间为4.355和4.502，想吧这两种物质分开，用甲醇和水比例为75：25洗脱，两种物质的保留时间为19.447和20.169，还是没有分开，试了好多梯度洗脱，有机相也减少到30%，但还是没分开，想请教大神，梯度洗脱摸索有什么技巧吗？因为我第一次接触，完全没有什么经验，感觉就是瞎弄，浪费了好多时间，所以希望各位能给我解释一下，先谢谢各位了。
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1楼 2018-04-25 21:25:44
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lygbxq

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hkhk哈哈: 金币+10 2018-05-17 12:09:56
你可以跑个梯度试试，0-30 min 20%甲醇-100%甲醇
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5楼2018-04-26 17:21:32
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tcwzb168

新虫 (正式写手)
性质差不多的两个物质，确实不好分

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11楼2018-04-28 07:47:39
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lingshu

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hkhk哈哈 at 2018-04-27 21:52:14
今天试了10-90甲醇，60min。一点用都没有...

看来梯度是不能解决问题的 你可以把化合物结构列出来  给你参谋一下  如果没有其他柱子  那么在流动相上下功夫   换乙腈  以及不同比例甲醇乙腈     水相  不同pH缓冲液等

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16楼2018-05-25 17:38:06
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lingshu

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by lygbxq at 2018-05-25 11:43:45
你把图放上来比较容易让大家来替你解决问题...

还可以调节柱温  等等  方法还是有很多的

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17楼2018-05-25 17:39:28
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普通回帖

无人理ok

铁杆木虫 (小有名气)

扬子江药业集团
乙腈可以吗

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努力工作
2楼2018-04-25 21:26:43
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filmlove

铁虫 (著名写手)
一般等度洗脱能起到最佳分离效果，两个物质分不开，你就不要想着梯洗了

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加油，幸福在等你
3楼2018-04-25 21:33:37
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hkhk哈哈

木虫 (小有名气)
有没有做液相了讨论一下啊
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4楼2018-04-25 21:42:13
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tcwzb168

新虫 (正式写手)
换个柱子吧

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6楼2018-04-26 22:30:14
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天心知

新虫 (小有名气)
降低流速或者降低甲醇比例都会提高分离度

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7楼2018-04-27 18:27:58
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天心知

新虫 (小有名气)
实在不行可能需要加盐调整流动相pH值

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8楼2018-04-27 18:29:30
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hkhk哈哈

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lygbxq at 2018-04-26 17:21:32
你可以跑个梯度试试，0-30 min 20%甲醇-100%甲醇

今天试了10-90甲醇，60min。一点用都没有
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9楼2018-04-27 21:52:14
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hkhk哈哈

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by tcwzb168 at 2018-04-26 22:30:14
换个柱子吧

实验室只有这一根柱子，所以。。。
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10楼2018-04-27 21:52:50
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