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ubey

银虫 (初入文坛)

[交流] 求助：MTT法细胞毒实验

请教各位做过细胞毒实验的大侠：
         我现在做MTT法细胞毒实验，用的细胞是MCF-7。测定结果很奇怪，高浓度给药时酶标仪测的MTT吸光度反而高，低浓度反而吸光度低。已经换了两次细胞株，做了好几次都是这样，排除细胞悬液没混匀问题。显微镜下观察发现死了的细胞会变黑，变成一个小黑圈。这个黑圈是不是影响了MTT测定结果啊，苦恼中啊~~~~不知道是什么问题
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细胞实验

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1楼 2009-03-20 17:13:22
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pal2004

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
ubey(金币+2,VIP+0):谢谢 3-24 15:47
ubey(金币+1,VIP+0):谢谢 3-24 15:49
你所说的细胞变黑，应该是凋亡细胞收缩变圆，造成折光性增强，轮廓变得更明显后的现象，应该是倒置显微镜下的正常现象。
MTT实验可能会受到被试药物的影响，所以你应该做溶剂和受试药物的对照，根据对照判断药物的细胞毒作用，而不是简单的比较不同药物浓度下的吸光度。
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4楼2009-03-24 15:36:05
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢您的建议！ 3-21 20:01
ubey(金币+2,VIP+0):谢谢啊 3-22 20:19
建议你用SRB方法，原来我的同事发文章，用MTT作效果不显著，而SRB非常好。用SRB我做过MCF-7，没有问题。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
2楼2009-03-21 13:29:45
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lhb2990

关于SRB的问题

我也在做MTT，请教SRB的具体做法是什么？
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3楼2009-03-23 23:08:21
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lyggyjl3788

木虫 (正式写手)
SRB也是检测细胞存活率的以一种方法，原理和MTT差不多，操作起来比MTT简单一些，个人感觉，不需要避光，时间上可能长一些，MTT是比较经典的方法，几十年乐，不过好多老板现在都改SRB了。
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6楼2009-05-04 14:46:11
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