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方青青88

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-52纯化多糖只有颜色测不出多糖

DEAE-52纤维素柱纯化多糖,洗脱剂0.02PBS、0.5MNacl的PBS、1M nacl 的PBS,用硫酸苯酚法检测多糖,收集吸光度2.0以上的管,因为样品本身颜色较深,所以洗脱过程中会有颜色下来,在用0.02PBS洗脱时颜色由浅到深再由深到浅,可以收集多管,但是!!在用0.5MNacl的PBS、1M nacl 的PBS时尽管颜色变化趋势一样,比0.02Pbs稍浅,但是测出来吸光度并没有2.0以上,都不符合,只有0.5MNacl的PBS的有两管2.4的,也用了其他浓度的Nacl连颜色都洗不下了。这是什么原因。
请教:1、如改用硫酸蒽酮法检测该收集吸光值多大的?
2、这里面有没有多糖?
3、怎么改进?
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