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Annette

金虫 (小有名气)

[求助] 免疫荧光抗体选择求助

我在转基因小鼠中表达人的某个蛋白,但是因为抗体有限,只有小鼠抗人的特异性单克隆抗体,这样做免疫荧光只能选择抗小鼠的荧光标记二抗了,这样会不会有什么问题?我自己做了一遍,没有强烈的非特异性背景。这样可行吗?
另外,我发现丙酮固定的荧光强度比同等条件下甲醛固定的荧光强度低很多,其他条件一致,这是什么原因?
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pph321

新虫 (小有名气)

能否上张荧光图看一下呢?一抗是鼠源的,来自小鼠的一抗,抗鼠的二抗都会结合,你说“没有强烈的非特异性背景”,这个让我不大相信

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2楼2018-04-22 14:27:37
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Annette

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pph321 at 2018-04-22 14:27:37
能否上张荧光图看一下呢?一抗是鼠源的,来自小鼠的一抗,抗鼠的二抗都会结合,你说“没有强烈的非特异性背景”,这个让我不大相信

组织是肝脏,冷冻前灌流过,并不是血液

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3楼2018-04-24 07:54:58
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