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未央*

新虫 (初入文坛)

[交流] 大肠杆菌工程菌发酵问题已有6人参与

最近培养大肠杆菌,发酵过程中总是出现停滞:发酵初期出现停滞,溶氧上翻至100左右,OD保持不变,ph略微上升,维持大概六七个小时,然后溶氧下降,再次生长,表达的蛋白是目的蛋白。这是什么情况

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未央*

新虫 (初入文坛)

2楼2018-04-21 09:14:45
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Feat落日

新虫 (初入文坛)


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溶氧上升100是不是培养基碳源不够了

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3楼2018-04-26 04:19:23
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


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引用回帖:
3楼: Originally posted by Feat落日 at 2018-04-26 04:19:23
溶氧上升100是不是培养基碳源不够了

培养初期,不会出现碳源不足的情况,如果是BL21的话,这种现象正常,但是出现这种状况后表达量会下降的
···
4楼2018-04-26 13:00:51
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风吹天边

铜虫 (正式写手)


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我们的专用培养基可使OD达到150以上,请问作为研究人员您会考虑试试吗?

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Fightting
5楼2018-07-21 16:27:19
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凤久夜

新虫 (初入文坛)


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也出现相同现象,请问发现原因了吗?或者有什么调整吗?
6楼2019-02-11 14:27:37
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空想主义

铜虫 (初入文坛)


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前期溶氧上升至100,推测应该是出现了大部分菌溶菌(原因估计是噬菌体,可以做噬菌斑实验进一步验证);菌没有全部死掉,有很少的菌经过6-7h的筛选过程,带有噬菌体抗性,后期逐渐生长起来。
为生活而工作
7楼2019-02-11 17:35:42
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hkzhkzhkz

新虫 (初入文坛)


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楼主,您好!我发酵遇到同样的问题,需要您的指导与帮助,我邮箱是kzhuang@nju.edu.cn

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8楼2022-06-22 07:25:05
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