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夏目1717

新虫 (初入文坛)

[交流] pkd46质粒提取 已有6人参与

本人提取pkd46质粒,浓度很低,做转化也失败,也加大菌液提取量,还是不行,有经验的相关技术指导资料有哪些?谢谢了!
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莫落

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
注意培养温度30摄氏度,可以适当加大amp的量

发自小木虫IOS客户端
2楼2018-04-20 15:31:35
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莫落

木虫 (正式写手)

转化的话部分菌可能需要电转,大肠杆菌DH5a直接化转就可以了

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-04-20 15:32:17
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夏目1717

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莫落 at 2018-04-20 15:31:35
注意培养温度30摄氏度,可以适当加大amp的量

谢谢,现在已经转化成功了。换成自己制备了感受态,就长单克隆了
4楼2018-05-14 17:04:46
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之里

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我现在急需pKD46载体做red重组系统,可以给予吗?或者我有你需要的,互换可以吗?
5楼2018-05-16 09:05:57
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏目1717 at 2018-05-14 17:04:46
谢谢,现在已经转化成功了。换成自己制备了感受态,就长单克隆了...

你好,请为你是用pKD46来做基因删除吗?
6楼2018-06-12 16:07:12
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Jennifer_qiu

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏目1717 at 2018-05-14 17:04:46
谢谢,现在已经转化成功了。换成自己制备了感受态,就长单克隆了...

你好,能传授一下经验吗?我最近也在提取并转化该质粒,也遇到了你遇到的情况
7楼2018-06-29 11:27:09
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prthefu

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主你好,想问一下,我从公司买了pKD46的甘油菌,涂板扩大培养提质粒后,想做个测序来验证质粒的正确性,但是查不到pKD46质粒的通用测序引物,请问楼主可以分享一下吗?或者是提了质粒怎么验证呢?
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
8楼2019-09-02 13:28:45
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房子没塌

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by Jennifer_qiu at 2018-06-29 11:27:09
你好,能传授一下经验吗?我最近也在提取并转化该质粒,也遇到了你遇到的情况...

您好,请问您解决这个问题了吗,最近在电转pKD46质粒一直转不进去呢
9楼2020-10-29 09:12:24
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