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夏目1717

新虫 (初入文坛)

[交流] pkd46质粒提取 已有6人参与

本人提取pkd46质粒，浓度很低，做转化也失败，也加大菌液提取量，还是不行，有经验的相关技术指导资料有哪些?谢谢了！
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1楼 2018-04-20 14:47:13
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莫落

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
注意培养温度30摄氏度，可以适当加大amp的量

发自小木虫IOS客户端
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2楼2018-04-20 15:31:35
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莫落

木虫 (正式写手)
转化的话部分菌可能需要电转，大肠杆菌DH5a直接化转就可以了

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3楼2018-04-20 15:32:17
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夏目1717

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 莫落 at 2018-04-20 15:31:35
注意培养温度30摄氏度，可以适当加大amp的量

谢谢，现在已经转化成功了。换成自己制备了感受态，就长单克隆了
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4楼2018-05-14 17:04:46
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之里

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，我现在急需pKD46载体做red重组系统，可以给予吗？或者我有你需要的，互换可以吗？
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5楼2018-05-16 09:05:57
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏目1717 at 2018-05-14 17:04:46
谢谢，现在已经转化成功了。换成自己制备了感受态，就长单克隆了...

你好，请为你是用pKD46来做基因删除吗？
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6楼2018-06-12 16:07:12
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Jennifer_qiu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏目1717 at 2018-05-14 17:04:46
谢谢，现在已经转化成功了。换成自己制备了感受态，就长单克隆了...

你好，能传授一下经验吗？我最近也在提取并转化该质粒，也遇到了你遇到的情况
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7楼2018-06-29 11:27:09
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prthefu

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好，想问一下，我从公司买了pKD46的甘油菌，涂板扩大培养提质粒后，想做个测序来验证质粒的正确性，但是查不到pKD46质粒的通用测序引物，请问楼主可以分享一下吗？或者是提了质粒怎么验证呢？
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
8楼2019-09-02 13:28:45
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房子没塌

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by Jennifer_qiu at 2018-06-29 11:27:09
你好，能传授一下经验吗？我最近也在提取并转化该质粒，也遇到了你遇到的情况...

您好，请问您解决这个问题了吗，最近在电转pKD46质粒一直转不进去呢
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9楼2020-10-29 09:12:24
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