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695木虫 (职业作家)
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[交流]
大家帮我看看这几个引物设计的怎么样，刚接触，谢谢
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准备做RT(反转录）-PCR，刚接触，请过来人帮我看看，这几个引物设计的怎么样，多谢了！ 1、 1CTCATAAGGCACCTCCGGTAAACCAAGCCGCCTTGCCGCTGGTAACCAAACCTCGAGCAG >>>>>>>>>>>>>>>>>>>> 61 TGTCCATATCCGTACCCATTACCAGCATAGTCGTTCCAGTACCGGTTTCAATTCCGATTC 121 CAGATTCAACGCCGCCATCTGTAGAGCTTGATGACTCCATAGTTGCCCCATGGGACTACC 181 AATTCTTATTCATGTCACAACGATCGGAAACCACTCAACCTATCACCCTACGTGTTGTGG 241 ATGGTGCAGTACCGGCCGATTTTCCGACCGGTACATACTATCTAACCGGACCTGGGATTC 301TCTCCGACGATCACGGATCGACGGTGCATCCCTTGGACGGCCATGGATACCTAAGAGCAT 361 TCACTTTTGATAATAATGTTACTAACAAAGTCAAATACATGGCTAAGTACATTAGAACCG 421 AGGCTCAATTGGAGGAGCATGACCCTAAGACCAACACGTGGAAATTCACTCATAGAGGTC 481 CATTTTCTGTGTTGAAAGGTGGGAAAAAGGTTGGGAATACTAAGGTCATGAAAAATGTGG 541 CTAACACTAGTGTGTTGAAGTGGGGGGAGAAGCTCCTGTGTATGTGGGAAGGTGGTGAAC 601 CATACGAGATGGAATCCGGTACATTGGATACGATCGGGCGATACAACATGATGGACGATT 661 GTGATTTGGATGATCATGAGAACCCCGGTGATCATGATGTTTGGGATGTTGCTGCTAGCT <<<<<<<<<<<<<<<<<<<< OLIGO start len tm gc% any 3' seq LEFT PRIMER 3 20 59.95 50.00 4.00 0.00 CATAAGGCACCTCCGGTAAA RIGHT PRIMER 717 20 60.26 45.00 3.00 0.00 TAGCAGCAACATCCCAAACA SEQUENCE SIZE: 741 INCLUDED REGION SIZE: 741 2、 1 GTCATTCTTTCCCTGCTACTGACCACTATGTTATTGTGCCTGAAATGCCTCTTAGATACT >>>>>>>>>>>>>>>>>>>> 61 GTGCTCAGAATTTACTAAAGGCTGAGCCTACTCCACTGTACAAGTTCCAGTGGCACCCTG 121 AATCCAAAGCTTTTATGCATGTCATGTGCAAGACTAGTGGAAAGATTGTGGCAAGTGTGG 181 AAGTGCCTCTGTTCATCACTTTCCATTTCATAAATGCGTACGAAGAGGAAGATGAAGATG 241 GGAGGGTGACGGCAGTTATTGCTGACTGTTGTGAGCACAATTCAAATACTGACATTCTTG 301AAAGGCTTAGATTACAGAATCTTCGCTCATTCAATGGCCAAGATGTTCTGCCAGATGCTA 361 AGGTTGGTCGGTTCAGAATACCTCTGGATGGGAGTCCAAATGGAACACTGGAACCAGCAT 421TAGACCCAAATGAACATGGGAAAGGCATGGACATGTGCAGCATAAACCCTAACTATTTAG 481 GGAAGAAATACAGATATGCCTATGCTTGTGGAGCAAACCGACCTTGTAACTTTCCCAACA 541CCCTCACCAAGCTTGATTTAGAGTTGAAAAAGGCTAAGACCTGGTATGATGAAGGTGCTG 601 TGCCATCTGAACCATTCTTTGTGGCTCGACCAGGAGCAACAGAGGAAGATGATGGTTAGA <<<<<<<<<<<<<<<<<<<< 661 CTAGCTACTACATTTGAAGCCTGTTCTCTCTAATATTCAGCCCCTTCT OLIGO start len tm gc% any 3' seq (5’-3’) LEFT PRIMER 5 21 59.86 47.62 2.00 2.00 TTCTTTCCCTGCTACTGACCA RIGHT PRIMER 655 21 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841 AACCGAAAACTAAGTGGCCGTCTTGATGAAATTGTAGAGAAGAGAATGAAGGATAAGGTC 901 AGAAGTTCCAAGGACTTCTTGTCACTCATTCTAAATGCAAGAGAATCAAAAACTGTTTCA 961 GAAAATGTGTTCACACCTGACTATATCAGTGCTGTTACTTATGAGCACCTGCTTGCAGGA 1021TCAGCAACCACATCCTTTACCTTGTCTTCCATTGTCTATTTGGTTGCTGGGCATCCAGAA 1081 GTTGAGAAAAAGATGCTTCAAGAGATTGATGGGTTTGGCCCAGTAGATCAGACACCAACT 1141 TCTCAAGATCTTCAAGAGAAGTTTCCTTACCTTGATCAGGTGATCAAAGAGGCCATGAGA 1201 TATTACACAGTCTCTCCATTGGTTGCAAGAGAAACATCAAATGAAGTAGAGATTGGAGGT 1261 TACCTTCTTCCAAAGGGGACTTGGGTCTGGTTAGCGCTTGGAGTTGTAGCAAAAGATCCC 1321 AGAAACTTTCCGGAGCCAGAAAAGTTCAAACCGGAGAGGTTTGATCCCAAATGTGAAGAA 1381 ATGAAAAGAAGACATCCTTATGCTTTCATACCATTTGGAATTGGTCCTCGGGCTTGCATT 1441 GGTCAGAAATTTTCCCTGCAAGAAATCAAGCTGTCTCTGATTCACTTATATAGGAAATAC 1501 TTGTTTCGGCATTCACCTAATATGGAGAATCCCTTAGAACTTGAATATGGCATAGTGCTC 1561 AACTTCAAGCACGGTGTCAAGGTTAGAGCCATAAAAAGAACAGAGAGGAGCTGCTAA OLIGO start len tm gc% any 3' seq(5’-3’) LEFT PRIMER 132 20 59.96 55.00 4.00 2.00 AGTTCCAGGTCCACCATCTG RIGHT PRIMER1578 20 59.88 50.00 5.00 3.00 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