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csl604412621

新虫 (小有名气)

[求助] Caco-2细胞不贴壁 就是不贴壁

之前养的细胞还能贴壁 长得还不错 最近细胞各种不贴壁 好挫败啊 五天了还是小球球一样的悬浮着 没有丝毫要贴壁的迹象 怎么排查问题啊
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csl604412621

新虫 (小有名气)

培养条件:10%胎牛血清+90%hyclone高糖DEEM培养基 没加双抗
2楼2018-04-19 10:05:17
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helio0320

新虫 (初入文坛)

我也是呀 楼主问题解决了吗
3楼2018-05-22 16:44:59
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cellmaxFBS

新虫 (初入文坛)

一、培养细胞不贴壁
可能原因:
●胰蛋白酶消化过度
●支原体污染
●培养基pH值过碱(NaHCO3分解)               
●细胞老化
●接种细胞起始浓度太低或太高
解决方法:
●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度
●分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
●使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2
●启用新的保种细胞
专注于细胞培养,欢迎大家来交流!
4楼2018-06-01 10:55:43
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//安生

金虫 (知名作家)

五天没贴壁,,,死了吧?是不是冻存的过程就出问题了啊?

发自小木虫Android客户端
日久不一定生情,但必定见人心。
5楼2018-06-02 08:09:40
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