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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取浓度很低
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puppy 琉夏

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取浓度很低 已有2人参与

我把质粒转染到大肠杆菌后，第一次抽提质粒用的3ml，提出来的质粒浓度是300ng/ul左右，但是后面再培养抽提的浓度就变得很低了，用50ml抽提的浓度才和第一次3ml抽提的浓度差不多大小，那位大神指点迷津，感激不尽啊

@youlinglyw @biostar2009 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2018-04-17 15:17:19
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AmyMeng同学

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-04-18 08:05:36
可能是大肠杆菌的菌落里面存活的大肠杆菌数量下降，可以试着多培养一段时间再抽提，看看结果如何

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2楼2018-04-17 15:43:33
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-04-18 08:06:01
如果摇菌已经过夜，浓度还是低。有可能是有杂菌生长，建议划线取菌，重新挑菌摇菌，再提取质粒……

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不是优秀，而是不可替代
3楼2018-04-17 16:19:07
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puppy 琉夏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by AmyMeng同学 at 2018-04-17 15:43:33
可能是大肠杆菌的菌落里面存活的大肠杆菌数量下降，可以试着多培养一段时间再抽提，看看结果如何

已经培养了13.5小时才提质粒的，而且那个时候菌液已经挺浑浊了，我怕再养久了里面会有很多死菌

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4楼2018-04-17 17:27:30
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puppy 琉夏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by didongwei at 2018-04-17 16:19:07
如果摇菌已经过夜，浓度还是低。有可能是有杂菌生长，建议划线取菌，重新挑菌摇菌，再提取质粒……

这个就是把冻存的菌划线复活，再单菌落培养，然后再取培养基的1/1000菌液培养后提质粒的

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5楼2018-04-17 17:29:33
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by puppy 琉夏 at 2018-04-17 17:27:30
已经培养了13.5小时才提质粒的，而且那个时候菌液已经挺浑浊了，我怕再养久了里面会有很多死菌
...

过夜的意思，一般是16个小时
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
6楼2018-04-17 23:28:35
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