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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 奇怪的配胶现象
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半点心

金虫 (正式写手)

[交流] 奇怪的配胶现象 已有1人参与

配SDS-PAGE的时候出现的种种怪现象
1：分离胶配完之后用水压线，胶凝了之后会出现两条线。。。。。。
2：如果溴酚蓝没跑出去就停止电泳，溴酚蓝距胶底的地方竟然染不上色
3：胶脱不了色
4：胶放在水里会膨胀

以上种种怪问题，有大神解答吗？
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1楼 2018-04-13 15:55:27
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匿名

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2楼2018-04-13 16:03:27
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3楼2018-04-13 16:07:57
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半点心

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 嗨皮开心果 at 2018-04-13 16:07:57
其实一般用蒸馏水都可以给胶脱色，脱色液一般是75ml的甲醇，225ml的冰乙酸，加蒸馏水定容至1L。有个快速脱色办法就是在沸水里煮蛋白胶脱色。

我们一般就是加点水，再加点乙醇，这样就脱色有点慢。想要快的话，我也会加点冰醋酸
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4楼2018-04-14 14:15:56
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半点心

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 嗨皮开心果 at 2018-04-13 16:03:27
下层分离胶做好了，建议用移液枪吸取无水乙醇沿着玻璃板滑过添加，一般2毫升就足够了。至于你跑胶需不需要将loading蓝色跑出来，建议你用预染蛋白marker，可以根据marker跑开程度以及你目的蛋白大小来判定是否可以停 ...

是的，我的marker是预染的marker,溴酚蓝跑不跑出来都可以，一般我都跑出去。就是唯一的一次没跑出去，竟然染不上色。染色问题，我有两块胶一起染的，一起脱的，竟然一块脱得了色，一块脱不了
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5楼2018-04-14 14:18:12
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匿名

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6楼2018-04-14 14:31:39
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半点心

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 嗨皮开心果 at 2018-04-14 14:31:39
你可以试试我的脱色液配方。
...

冰醋酸那么多不刺鼻吗
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7楼2018-04-18 16:06:31
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匿名

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8楼2018-04-18 20:53:43
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