应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于细菌蛋白表达！
31/1返回列表
查看: 234  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于细菌蛋白表达！

现在有2个DNA序列，其编码序列等完全一致，唯一不同的是a序列前面添加了来自酵母菌的信号肽（约200bp），b序列没加；
发现a、b转化大肠杆菌后，a转化菌长得比b转化菌慢。
请问各位，这是挑取的单克隆差异呢？还是加了信号肽的原因？应该从哪方面着手分析？是二级结构么？

刚听说增加了分泌信号会影响生长速度。请问是什么原理？而且，来自酵母的a-信号肽也能影响细菌生长么？

多谢解惑了。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-03-18 22:04:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻5飞扬

金虫 (正式写手)
序列编码一致但加上信号肽后序列就不一致了呀
不知道你转化的是什么样的e.coli是做克隆还是做表达,如果做克隆,我认为有这样两种原因,一种就是你挑取的克隆有区别,所以菌生长速度有区别,这个要你重复挑菌来验证一下你的结果是不是可以重复,另一种原因就是当有了信号肽后这个克隆有毒性.这方面的情况我见过,我转化过两种荧光克隆,GFP和RFP,至少我做过的T载体接入的, pGreen接入的,和PBI接入的,在DH5a和农杆菌LBA4404中RFP长的都比GFP慢很多,但二者的序列只有少数碱基的替换,从而表明RFP本身是有毒性的.
赞一下 回复此楼
2楼2009-03-18 23:14:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)
好的，谢谢！受益匪浅。
我是用来做表达的。用的宿主菌是BL21（DE3）

[ Last edited by melodyxin on 2009-3-19 at 20:02 ]
赞一下 回复此楼
3楼2009-03-19 20:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 melodyxin 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +5 yunziaaaaa 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:57 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭