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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

[求助] 肺炎克雷伯菌感受态制备 已有1人参与

各位大神有没有人做过肺炎克雷伯菌的感受态细胞,将大肠的质粒电转入肺炎克雷伯菌有人做出来过吗?
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snoopytbw

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小冀-: 金币+3, 鼓励回帖交流 2018-06-26 20:58:38
肺克蛮好做的哇,一般质粒类型不同的话,其实可以转的,短期可以稳定,但容易丢失

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3楼2018-04-11 20:34:07
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biosci

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恐怕不行啦,不是一个系统的质粒,不能混用

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2楼2018-04-11 14:47:22
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-11 20:34:07
肺克蛮好做的哇,一般质粒类型不同的话,其实可以转的,短期可以稳定,但容易丢失

真的吗,我做了几次肺克的感受态,发现离心后菌沉不下去,菌液的浓度也够,做转化一直没转过去,请问您是怎么做的,可以交流一下吗?
4楼2018-04-12 12:24:38
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-04-11 14:47:22
恐怕不行啦,不是一个系统的质粒,不能混用

是可以的
5楼2018-04-12 12:25:12
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snoopytbw

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4楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2018-04-12 12:24:38
真的吗,我做了几次肺克的感受态,发现离心后菌沉不下去,菌液的浓度也够,做转化一直没转过去,请问您是怎么做的,可以交流一下吗?...

对,会这样的,我也遇到过,浓度低一点,另外,你的受体菌(肺克)选ATCC的吧,如果用直接分离的,可能会做不出来,带荚膜蛋白的话,菌体会拉丝,粘稠
6楼2018-04-13 16:20:40
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-13 16:20:40
对,会这样的,我也遇到过,浓度低一点,另外,你的受体菌(肺克)选ATCC的吧,如果用直接分离的,可能会做不出来,带荚膜蛋白的话,菌体会拉丝,粘稠...

你好,我想咨询下,肺炎克雷伯菌在传代过程中,在麦康凯板上的菌落从湿润的大圆型菌落变成了有点干燥的暗红色,挑起来还会有拉丝现象,但是没原来的念了,不知道怎么回事,请问你们也遇到过这种现象吗
7楼2018-06-26 17:46:49
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snoopytbw

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【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-13 16:20:40
对,会这样的,我也遇到过,浓度低一点,另外,你的受体菌(肺克)选ATCC的吧,如果用直接分离的,可能会做不出来,带荚膜蛋白的话,菌体会拉丝,粘稠...

没试过麦康凯,一般肺克都比较粘的,拉丝很正常

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8楼2018-06-26 20:09:33
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匿名

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9楼2018-09-05 21:16:49
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2018-04-12 12:24:38
真的吗,我做了几次肺克的感受态,发现离心后菌沉不下去,菌液的浓度也够,做转化一直没转过去,请问您是怎么做的,可以交流一下吗?...

你用的不是模式菌吧,找模式菌做感受态比较好
10楼2018-09-06 09:12:57
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