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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 肺炎克雷伯菌感受态制备
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

[求助] 肺炎克雷伯菌感受态制备 已有1人参与

各位大神有没有人做过肺炎克雷伯菌的感受态细胞，将大肠的质粒电转入肺炎克雷伯菌有人做出来过吗？
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1楼 2018-04-10 16:53:57
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
★ ★ ★
小冀-: 金币+3, 鼓励回帖交流 2018-06-26 20:58:38
肺克蛮好做的哇，一般质粒类型不同的话，其实可以转的，短期可以稳定，但容易丢失

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3楼2018-04-11 20:34:07
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
恐怕不行啦，不是一个系统的质粒，不能混用

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2楼2018-04-11 14:47:22
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-11 20:34:07
肺克蛮好做的哇，一般质粒类型不同的话，其实可以转的，短期可以稳定，但容易丢失

真的吗，我做了几次肺克的感受态，发现离心后菌沉不下去，菌液的浓度也够，做转化一直没转过去，请问您是怎么做的，可以交流一下吗？
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4楼2018-04-12 12:24:38
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-04-11 14:47:22
恐怕不行啦，不是一个系统的质粒，不能混用

是可以的
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5楼2018-04-12 12:25:12
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2018-04-12 12:24:38
真的吗，我做了几次肺克的感受态，发现离心后菌沉不下去，菌液的浓度也够，做转化一直没转过去，请问您是怎么做的，可以交流一下吗？...

对，会这样的，我也遇到过，浓度低一点，另外，你的受体菌（肺克）选ATCC的吧，如果用直接分离的，可能会做不出来，带荚膜蛋白的话，菌体会拉丝，粘稠
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6楼2018-04-13 16:20:40
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-13 16:20:40
对，会这样的，我也遇到过，浓度低一点，另外，你的受体菌（肺克）选ATCC的吧，如果用直接分离的，可能会做不出来，带荚膜蛋白的话，菌体会拉丝，粘稠...

你好，我想咨询下，肺炎克雷伯菌在传代过程中，在麦康凯板上的菌落从湿润的大圆型菌落变成了有点干燥的暗红色，挑起来还会有拉丝现象，但是没原来的念了，不知道怎么回事，请问你们也遇到过这种现象吗
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7楼2018-06-26 17:46:49
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-13 16:20:40
对，会这样的，我也遇到过，浓度低一点，另外，你的受体菌（肺克）选ATCC的吧，如果用直接分离的，可能会做不出来，带荚膜蛋白的话，菌体会拉丝，粘稠...

没试过麦康凯，一般肺克都比较粘的，拉丝很正常

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8楼2018-06-26 20:09:33
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匿名

用户注销 (小有名气)
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9楼2018-09-05 21:16:49
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2018-04-12 12:24:38
真的吗，我做了几次肺克的感受态，发现离心后菌沉不下去，菌液的浓度也够，做转化一直没转过去，请问您是怎么做的，可以交流一下吗？...

你用的不是模式菌吧，找模式菌做感受态比较好
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10楼2018-09-06 09:12:57
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