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yelinlin

木虫 (著名写手)

[交流] 激发和发射波长

我用荧光光度计测定叶绿素a的激发和发射波长,发现在激发波长为347,388,439时,发射波长都是676,那么说明发射波长就是676吧,最大激发波长是439,是这样理解么,求助中......
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yelinlin

木虫 (著名写手)

在测定时,选择那个激发波长,是最大的激发波长么
2楼2009-03-18 18:27:19
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opq691

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347nm~676nm 很像是倍频峰(有可能是散射峰),要不把扫的图贴上来看看
▄︻┳═一*▄︻┳═一*众里寻虫千百度,蓦然回首,虫在酱油坛深处!▄︻┳═一*▄︻┳═一*
3楼2009-03-18 19:58:22
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opq691

荣誉版主 (知名作家)

小木虫酱油店店主

优秀版主

★ ★ ★
佳怡(金币+3,VIP+0)::)感谢应助 3-20 08:18
不管激发波长选择多少,电子都是从第一电子激发态的最低振动能层跃迁到基态的各个振动能层的,所以采用较短的或较长的激发波长激发,再与原光谱图比较,就可以很容易的辨别出荧光物质的荧光光谱。找到最大激发或发射后反过来扫描一下,即可得知最终的结果。发光体本身的光谱是不会随你改变激发或发射波长而变化的,当然,加入其他物质另当别论,有可能发生红移或紫移


叶绿素  激发/发射:450/676nm 具体每个仪器可能稍微有所不同

[ Last edited by opq691 on 2009-3-18 at 20:55 ]
▄︻┳═一*▄︻┳═一*众里寻虫千百度,蓦然回首,虫在酱油坛深处!▄︻┳═一*▄︻┳═一*
4楼2009-03-18 20:20:38
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syt7839

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
佳怡(金币+3,VIP+0)::)感谢应助 3-20 08:18
发现在激发波长为347,388,439时,发射波长都是676,那么说明发射波长是676,但是然后再做激发谱,用最大发射波长676发射,最大激发谱的波长是多少比如436,那么再用436激发反过来做发射谱,这样的话保证436处激发的发射谱强度最大,就可以了,如果最大发射峰676的位置是激发峰338的强度的2倍,那就是倍频峰,倍频峰不是荧光峰,而且还是尖峰,荧光峰应该是比较平滑的钝峰
5楼2009-03-19 09:31:39
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changtian

银虫 (小有名气)

★
佳怡(金币+1,VIP+0)::)感谢应助 3-20 08:18
以前查过叶绿素a的激发光谱,激发波长在470nm左右,发射在680nm。楼主可以参考一下
6楼2009-03-19 11:22:29
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gcc007

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★
jsys(金币+2,VIP+0):感谢应助! 3-29 15:57
4楼的基本正确,需要用676nm作为发射波长扫描激发图谱,看最大激发波长在哪。有一点需要补充,并不是所有的荧光峰都是平滑的宽峰,稀土离子比如铕和铽的荧光峰就是尖锐的线状光谱
7楼2009-03-29 13:50:44
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