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yudanxx.611

[交流] 求助胶回收问题

急求急急!!!!我在PCR之后进行胶回收,且PCR的时候只有一条1400bp的一条带,但是回收后跑电泳,却出现了两条带,分别在1400bp和3000bp,我切胶时也十分小心,而且一共做了3次都是同样结果,怀疑是试剂盒被污染,于是进行别的片段PCR回收,却十分正常,我想问问各位大侠会不会我的1400bpPCR片段在回收时自己自连了,于是出现了3000bp左右的带。多谢各位大侠!
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

这个正常,agarose gel 的分辨率有限,另外有可能是你的pcr产物浓度比较大,你可以试试产物纯化之后再胶回收
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-03-18 19:23:40
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jasco

木虫 (正式写手)

没有连接酶,且片段没有磷酸化,是不可能片段自己连接的,
2楼2009-03-18 15:48:12
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

呵呵,楼上正解,在核算浓度过大的时候会出现二聚体的带。如果真的必要分开,那就脉冲电泳吧。
For my life!
4楼2009-03-18 21:37:03
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