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之前从野生型模板里面P一段大小为300bp的目的片段， 退火温度51℃。一开始用PS体系没有P出来，改用rTaq体系后成功P出来且挺亮。 过了一段时间后，用相同的体系重新再P，再也p不出原来的亮度，且双酶切过柱后浓度不到10ng/ul，无法用作酶连。 开始怀疑是模板污染，于是借用他人模板，情况时好时坏，有的亮有的淡，问了师姐后改变加样方式，用别人的模板p，依旧很淡。现在找不出原因，浓度一直不达标，不知道诸位对这种现象有什么看法或者见解 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2018-04-05 15:15:41