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俊俊思密达

新虫 (小有名气)

[求助] 里氏木霉基因改造筛选标记选择

出发菌株里氏木霉含有潮霉素抗性基因。使用了g418抗性筛选,最低抑制浓度为100ug/ml,原生质体转化后发现,有转化子,可是转化子不能产孢传代,且菌菌pcr条带很淡。尝试了草铵膦抗性,不能抑制菌丝的生长,但是浓度越高发现产孢越少。请问有没有其他做过里氏木霉基因改造成功的,使用的是什么抗性「除了潮霉素」???

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angelyou

铁虫 (小有名气)

我也是这个问题,潮霉素耐性太强,随机插入的转化子没有表形正常的

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2楼2018-04-04 07:38:37
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angelyou

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by angelyou at 2018-04-04 07:38:37
我也是这个问题,潮霉素耐性太强,随机插入的转化子没有表形正常的

而且我还是野生菌株………

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3楼2018-04-04 07:39:10
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帕戴维

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by angelyou at 2018-04-04 07:39:10
而且我还是野生菌株………
...

是不是潮霉素耐受不稳定呢?这就没法筛选突变株了。急求

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4楼2020-10-31 00:22:20
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