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stantontang

金虫 (小有名气)

[求助] 关于RAW264.7长触角问题

我从中国科学院上海生命科学研究院买的细胞
刚到时是圆形的,我用了自带的培养基传代了一次,就长了触角。
传代过程如下
1,完全吸走原培养基,待用
2,用PBS洗两遍
3,用1mL胰酶消化5分钟
4,加2mL自带培养基轻柔吹打下细胞
5,各取1.5mL吹打下来的细胞,传到两个含原培养基的培养皿中

24h后过去看细胞状态,就长了触角,形状不规则

求大神看看这是什么原因?是胰酶消化的原因还是胰酶没有离心出去?
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下雨天喵喵

新虫 (著名写手)

吸走胰酶,加4ml培养基吹打,离心,1ml培养基重悬,传代。我们是这种方法

发自小木虫Android客户端
2楼2018-03-31 11:19:39
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

这个细胞不能用胰酶消化,血清质量要好,否则容易受刺激分化而长触角

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-03-31 13:11:44
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 下雨天喵喵 at 2018-03-31 11:19:39
吸走胰酶,加4ml培养基吹打,离心,1ml培养基重悬,传代。我们是这种方法

这样传代你们的细胞没有分化吗?
4楼2018-03-31 16:47:30
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 314300420 at 2018-03-31 13:11:44
这个细胞不能用胰酶消化,血清质量要好,否则容易受刺激分化而长触角

不用胰酶消化怎样能把细胞弄下来?
5楼2018-03-31 16:48:10
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下雨天喵喵

新虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by stantontang at 2018-03-31 16:47:30
这样传代你们的细胞没有分化吗?...

没有分化啊,血清用的gibico,灭活过。楼上不用胰酶是用细胞刮直接把细胞刮下来的吧,可以的。

发自小木虫Android客户端
6楼2018-03-31 17:28:15
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peiyaqiao

新虫 (初入文坛)

不能用胰酶消化,需要用细胞刮,还有需要用好一点的血清

发自小木虫Android客户端
7楼2018-04-03 00:07:29
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