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还是小号

新虫 (小有名气)

[求助] PCR总是出现引物二聚体 已有2人参与

相同的体系,相同的PCR操作条件,别人做出来没有引物二聚体,而我做出来一直有引物二聚体。引物浓度做了梯度实验,每个都有引物二聚体,并且引物二聚体越多,目的基因的条带也越亮。是操作的问题吗?还是需要优化条件?求各位大神不吝指导,拜托拜托

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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般pcr不会出现特别明显的引物二聚体条带,会是很暗的一条,只要不影响目的片段的获得就没事~如果条带太深,可以考虑是加的太多,或引物质量不好~其次就是你的条件了
···
2楼2018-03-29 16:42:10
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shmilying

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

建议你加的时候不要按照步骤一步步加,将量放大几倍,然后一次加到EP管后,分装,,,然后跑PCR,,,效果绝对杠杠滴。。。。
何处是我的岸
3楼2018-05-30 22:24:04
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