24小时热门版块排行榜    

查看: 1373  |  回复: 8

松五学子

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助原核蛋白表达问题 已有1人参与

最近原核表达载体,使用的酶切位点是:XhoI和HindIII,载体是:PET-32a,序列测序都正确,利用LB培养基,诱导表达的蛋白是大小在25kDa和35kDa之间,而我的目的蛋白是40多kDa,请问这是什么问题引起的?恳请各位给予帮助指导,谢谢!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有时候预测的不准(如果某种氨基酸含量高得话),另外你的marker是不是不太准
2楼2018-03-28 04:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松五学子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2018-03-28 04:51:54
有时候预测的不准(如果某种氨基酸含量高得话),另外你的marker是不是不太准

谢谢您的回复,请问哪些氨基酸存在的时候,预测会不准呐?我实验室一直用这个marker,准确性没有问题。

发自小木虫Android客户端
3楼2018-03-28 09:05:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)

我也遇到了 差15kD  楼主解决了吗

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-04-09 11:04:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
5楼2018-04-09 13:08:17
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
6楼2018-04-09 13:13:23
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

松五学子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Cuic_Qing at 2018-04-09 11:04:13
我也遇到了 差15kD  楼主解决了吗

重新更换了酶切位点,还没有找到原因,求大神指教啊

发自小木虫Android客户端
7楼2018-04-10 21:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松五学子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 深蓝浅蓝玲 at 2018-04-09 13:08:17
32a载体前面还有两个大标签,预测的时候算进去了吗?

32a空载大小大约是18kDa,我的目的片段720bp,这样计算下来,我表达的融合蛋白应该是四十多才对

发自小木虫Android客户端
8楼2018-04-10 21:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 松五学子 at 2018-04-10 21:32:38
32a空载大小大约是18kDa,我的目的片段720bp,这样计算下来,我表达的融合蛋白应该是四十多才对
...

不是算目的基因表达的蛋白吗 你怎么载体的也算上了

发自小木虫IOS客户端
9楼2018-04-11 13:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 松五学子 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:01 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见