应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求助原核蛋白表达问题
91/1返回列表
查看: 1162  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

松五学子

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助原核蛋白表达问题 已有1人参与

最近原核表达载体，使用的酶切位点是：XhoI和HindIII，载体是：PET-32a，序列测序都正确，利用LB培养基，诱导表达的蛋白是大小在25kDa和35kDa之间，而我的目的蛋白是40多kDa，请问这是什么问题引起的？恳请各位给予帮助指导，谢谢！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-03-27 23:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有时候预测的不准（如果某种氨基酸含量高得话），另外你的marker是不是不太准
赞一下 回复此楼
2楼2018-03-28 04:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松五学子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2018-03-28 04:51:54
有时候预测的不准（如果某种氨基酸含量高得话），另外你的marker是不是不太准

谢谢您的回复，请问哪些氨基酸存在的时候，预测会不准呐？我实验室一直用这个marker，准确性没有问题。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-03-28 09:05:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)
我也遇到了 差15kD  楼主解决了吗

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-04-09 11:04:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2018-04-09 13:08:17
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2018-04-09 13:13:23
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

松五学子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Cuic_Qing at 2018-04-09 11:04:13
我也遇到了 差15kD  楼主解决了吗

重新更换了酶切位点，还没有找到原因，求大神指教啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2018-04-10 21:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松五学子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 深蓝浅蓝玲 at 2018-04-09 13:08:17
32a载体前面还有两个大标签，预测的时候算进去了吗？

32a空载大小大约是18kDa，我的目的片段720bp，这样计算下来，我表达的融合蛋白应该是四十多才对

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2018-04-10 21:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 松五学子 at 2018-04-10 21:32:38
32a空载大小大约是18kDa，我的目的片段720bp，这样计算下来，我表达的融合蛋白应该是四十多才对
...

不是算目的基因表达的蛋白吗 你怎么载体的也算上了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2018-04-11 13:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 松五学子 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 考研化学308分求调剂 +7 你好明天你好 2026-03-23 8/400 2026-03-23 18:39 by macy2011
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭