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tdong06

木虫 (正式写手)

[交流] 如何将质粒直接导入染色体中?

我现在做的一个实验是GFP标记,电转化将质粒导入了受体菌中,但是不完全表达,也就是这个受体菌能够在本来不生长的抗生素平板上生长了,细菌形态也完全是一样的,当然这个还要进行质粒检测才能完全确定。但是这个方法估计是行不通了。
所以干脆直接将质粒导入染色体上得了,不晓得哪位虫友遇到相似的情况,可以一起讨论下,比如这个实验的具体操作是怎样的?需要注意的方面等等。谢谢啦!!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-9 at 11:58 ]
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

同源重组
2楼2009-03-17 08:17:39
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

转座?,看看相关的东西对你有没有用。
金币是赌出来的
3楼2009-03-17 09:31:22
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tdong06

木虫 (正式写手)

好的。谢谢楼上的指导,我是研一的,所以有很多的东西不是很清楚。。
4楼2009-03-17 23:07:36
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panqiuzhen

可以直接转入动物细胞或植物细胞,在荧光显微镜下观察。
5楼2009-03-18 08:01:18
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tdong06

木虫 (正式写手)

我这个是转入到细菌,可是用质粒电转化进去,质粒没有完全表达,就是能够表达抗性,但是不发荧光,这个是很大的问题,质粒不是我做的,所以我想重新构建质粒,但是老板觉得这样会花很多的时间,他不是很想这样,呵呵。。。现在我想偷偷的进行构建质粒。再进行电转化,看效果是怎么样的,实在不行也考虑把这个GFP基因转入到染色体上,那样估计更加麻烦点。。
6楼2009-03-18 23:13:14
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