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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何扩增找出一段基因序列的全长序列
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)

[求助] 如何扩增找出一段基因序列的全长序列 已有1人参与

群里的大神们：
      请教下原核生物现在某一基因只有部分序列，如何扩增得到它的全长序列？查了相关资料大多用RACE，但是基本都是真核生物的，原核生物能用吗？还有一种genome walking，能用吗？做过的小虫们麻烦告知一下吧，谢谢！！！
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1楼 2018-03-26 09:53:35
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柒月橘以北

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
drwhoknowss: 金币+3, 鼓励交流 2018-03-26 22:55:09
用takara的genome walking试剂盒也能做，不用试剂盒的话，可以参照《partially overlapping primer-based PCR for genome walking》这篇文献的方法也能做出来

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5楼2018-03-26 17:49:54
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普通回帖

柒月橘以北

木虫 (正式写手)
可以用genome walking

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2楼2018-03-26 10:13:32
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季牡突
你

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3楼2018-03-26 10:32:54
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 柒月橘以北 at 2018-03-26 10:13:32
可以用genome walking

请问这个步移法怎么做？要用试剂盒吗

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4楼2018-03-26 14:08:56
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 柒月橘以北 at 2018-03-26 17:49:54
用takara的genome walking试剂盒也能做，不用试剂盒的话，可以参照《partially overlapping primer-based PCR for genome walking》这篇文献的方法也能做出来

好的好的，那我试试。谢谢啦~~~
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6楼2018-03-27 08:41:50
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 柒月橘以北 at 2018-03-26 17:49:54
用takara的genome walking试剂盒也能做，不用试剂盒的话，可以参照《partially overlapping primer-based PCR for genome walking》这篇文献的方法也能做出来

那个RACE法你用过吗？我看好多都是拿这个方法做的，不过都是真菌类。想问问细菌上是否可以用
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7楼2018-03-27 08:54:11
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柒月橘以北

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 婷宝宝2013 at 2018-03-27 08:54:11
那个RACE法你用过吗？我看好多都是拿这个方法做的，不过都是真菌类。想问问细菌上是否可以用...

race一般扩增末端序列，细菌dna扩增没必要用race

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8楼2018-03-27 19:05:40
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 柒月橘以北 at 2018-03-27 19:05:40
race一般扩增末端序列，细菌dna扩增没必要用race
...

OK，Thanks♪(･ω･ﾉ
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9楼2018-03-27 20:48:01
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 柒月橘以北 at 2018-03-26 17:49:54
用takara的genome walking试剂盒也能做，不用试剂盒的话，可以参照《partially overlapping primer-based PCR for genome walking》这篇文献的方法也能做出来

还想再请教一下，takara歩移那个试剂盒扩增是5端上游和3端下游都能扩出来吗？今天有听到说3端下游序列不好做
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10楼2018-03-28 20:36:35
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