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hemary

新虫 (初入文坛)


已领完
细菌基因敲除质粒构建
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本人小白,刚刚接触细菌基因敲除,目前已经得到了同源臂片段,而且已经将两个同源臂连接到一起并且连接到cloning vector pJET上,酶切,胶回收,条带都正确,但是双酶切之后就是连接不到sucide vector上 每次做完转化板子上都没有俊。酶切位点都没有错,质粒上也有这两个位点。请大神们指点!!不胜感激!!

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hemary

新虫 (初入文坛)


大神们..求指点为什么都领没人说话呢

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13楼2018-03-19 21:56:32
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KNSS-Bio

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1,先看看载体抗生素抗性是否使用正确,2,换无缝克隆的方法试试

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23楼2018-03-19 22:32:24
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超世之英才

铁杆木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
无缝克隆吧,换个试剂盒都比你多做几遍省钱多了。

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35楼2018-03-20 02:56:37
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
找公司做吧,就是个熟练问题

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38楼2018-03-20 07:44:24
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hemary

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
23楼: Originally posted by KNSS-Bio at 2018-03-19 22:32:24
1,先看看载体抗生素抗性是否使用正确,2,换无缝克隆的方法试试

没做过无缝克隆,求指导

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39楼2018-03-22 16:03:41
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hemary

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
35楼: Originally posted by 超世之英才 at 2018-03-20 02:56:37
无缝克隆吧,换个试剂盒都比你多做几遍省钱多了。

无缝克隆怎么做,求指导

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40楼2018-03-22 16:04:12
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开小猫

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
无缝克隆有试剂盒,按说明书做就行,可能还是载体或者片段酶切没切好

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41楼2018-04-03 18:29:21
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2018-03-19 21:42   回复  
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wdxmu4楼
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莫落7楼
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李保磊15楼
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M塞北16楼
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aishida17楼
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花酿18楼
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wuyuanqing20楼
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KNSS-Bio21楼
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127235615222楼
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nono200929楼
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yuanswu30楼
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you367425132楼
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ln98533楼
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still200837楼
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