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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒提取溶液III的配制问题
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xbburton

至尊木虫 (小有名气)

[交流] 质粒提取溶液III的配制问题

最近配制质粒提取溶液3，不知为什么用醋酸始终不能调到所需的酸度（加醋酸的量已经很大了，但pH值仍变化的很少），请问这应该是什么原因？我如果按说明量加入醋酸钾和醋酸后，改用HCl调pH是否可行？
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1楼 2009-03-15 06:50:44
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
溶液Ⅲ：5 mol/L KAc 60ml,冰醋酸 11.5ml, H2O 28.5ml,定容至100ml, 并高压灭菌。
或者取29.4克KAc溶于60毫升无菌水中，加入11.5毫升冰醋酸，用无菌水定容到100毫升，所得溶液即为5 mol/L KAc，保存于4°C
我提的时候没调过PH值
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2楼2009-03-15 10:57:18
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zl382

铁虫 (小有名气)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-15 16:45
要加热才能溶解，而且温度在60左右加热，不要太高了，pH值要调的。
还有一点要注意的是：不要高压灭菌，抽滤灭菌，因为醋酸是弱酸，高压加热灭菌会挥发，使里面的醋酸根浓度就不准确了！
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后退，绝对是无路可走！
3楼2009-03-15 12:42:22
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xbburton

至尊木虫 (小有名气)
谢谢各位了，pH值必须得确定，否则就不一定好用了。因为这种提取方法使用溶液3的目的就是中和溶液2的碱性，使反应体系恢复中性状态而使质粒复性的。我的意思是为什么我用冰醋酸无法调节pH值到5.2，出现这种情况的原因是什么？另外，是否可以用HCL调pH至5.2，有经验的请赐教，谢谢啦。
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4楼2009-03-15 16:20:27
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
引用回帖:
Originally posted by xbburton at 2009-3-15 16:20:
谢谢各位了，pH值必须得确定，否则就不一定好用了。因为这种提取方法使用溶液3的目的就是中和溶液2的碱性，使反应体系恢复中性状态而使质粒复性的。我的意思是为什么我用冰醋酸无法调节pH值到5.2，出现这种情况的 ...

醋酸属于弱酸吧，估计需要加好多的溶液，所以为了保证体积的准确还是用盐酸最好
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会当凌绝顶，一览众山小
5楼2009-03-15 16:47:03
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zl382

铁虫 (小有名气)
可以调到5.2，我都调到4.8都可以。称好醋酸钾后，只加少量水，其余的加醋酸，最后也只需加一点点水就到定容的体积了。这个虽说不好配，但也没你说的那么费劲啊。
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后退，绝对是无路可走！
6楼2009-03-15 17:15:17
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