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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 低分子量麦谷蛋白的提取和电泳
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幻蓝帆

新虫 (初入文坛)

[求助] 低分子量麦谷蛋白的提取和电泳 已有1人参与

求大神详细告知低分子量麦谷蛋白的提取方法及提取试剂。还有低分子量麦谷蛋白SDS-PAGE电泳的操作及注意事项。谢谢
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1楼 2018-03-19 12:36:12
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蔚灵海

铜虫 (正式写手)
低分子量蛋白不建议你用SDS-PAGE的方法分离，常规浓度的胶基本上没办法分离几KDa的蛋白，4-20%的梯度胶的分离范围比较大，但是你最后跑出来的条带可能会挤在一起的，个人建议你用Tricine-SDS-PAGE，但这个在实验室一般不太好配制，一般会选择买预制胶，我们实验室之前分离过一次就是买的预制胶，我记得伯乐的好像有这款胶，国内的上海万生昊天生物好像也有这款胶，你可以多咨询几家看看，生物试剂的一般折扣都挺大的
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3楼2018-03-28 12:57:08
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不太清楚麦谷蛋白变性后亚基大小为多少。
一般来说几KD蛋白用SDS-PAGE很难分离，Tricine-SDS-PAGE分离效果较好，我是在文献上面看到的，自己没做过。、
同时超低分子量Marker在普通SDS-PAGE上也很难分开，之前用12%、15%分离胶跑索莱宝超低分子量Marker，拖尾严重。
个人一点点理解~
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只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！
2楼2018-03-22 12:41:24
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