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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wz1939

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR电泳条带不明显，怎么调整条件 已有2人参与

RNA反转录成为cDNA，进行PCR电泳条带不明显，怎么调整条件？

@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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1楼 2018-03-15 15:21:36
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bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
条带不明显，估计这个RNA发生了降解，没其他办法，如果时间充足，重新提取RNA
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生活活生生累死
2楼2018-03-15 16:51:00
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wz1939(drwhoknowss代发): 金币+5, 鼓励交流 2018-03-16 01:50:24
1.RNA跑电泳看看，18s和28s核糖体RNA条带是否正常？完整性如何？是否有降解？
2.cDNA反转的好好可以扩内参基因试试，像gapdh、actin等。
以上都没问题再考虑PCR无条带的问题。
做pcr时最好和对照一起做，排除操作失误，可以考虑的问题有，cDNA稀释、cDNA模板用量（不超过pcr反应体系的10%）、引物设计等。
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2019更好更棒!
3楼2018-03-15 20:33:39
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wz1939

新虫 (初入文坛)
谢谢

发自小木虫Android客户端
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4楼2018-03-15 23:41:38
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