24小时热门版块排行榜    

查看: 774  |  回复: 3

wz1939

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR电泳条带不明显,怎么调整条件 已有2人参与

RNA反转录成为cDNA,进行PCR电泳条带不明显,怎么调整条件?

@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
条带不明显,估计这个RNA发生了降解,没其他办法,如果时间充足,重新提取RNA
生活活生生累死
2楼2018-03-15 16:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wz1939(drwhoknowss代发): 金币+5, 鼓励交流 2018-03-16 01:50:24
1.RNA跑电泳看看,18s和28s核糖体RNA条带是否正常?完整性如何?是否有降解?
2.cDNA反转的好好可以扩内参基因试试,像gapdh、actin等。
以上都没问题再考虑PCR无条带的问题。
做pcr时最好和对照一起做,排除操作失误,可以考虑的问题有,cDNA稀释、cDNA模板用量(不超过pcr反应体系的10%)、引物设计等。
2019更好更棒!
3楼2018-03-15 20:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wz1939

新虫 (初入文坛)

4楼2018-03-15 23:41:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wz1939 的主题更新
信息提示
请填处理意见