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同源重组的单双交换 已有2人参与
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在做基因敲除 已将目的基因上下游共2000bp连接到pdm4并转入到s17-1中 在做接合实验中 供体菌耐Cm 受体菌耐N 双抗板上长出了菌 之后用只含N的LB摇单菌 并转移到20%蔗糖板上 过夜后 将单菌分别在Cm N两种板上筛选 取只在N上的菌进行pcr鉴定 共鉴定了81个菌 都没有那2000bp的片段 不确定双交换是否是在双抗板上已经完成?因为怀疑摇菌那一步把质粒丢了 所以没办法在蔗糖板上完成第二次交换?谢谢各位 发自小木虫IOS客户端 |
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