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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 同源重组的单双交换
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summuryi

新虫 (小有名气)

[交流] 同源重组的单双交换 已有2人参与

在做基因敲除 已将目的基因上下游共2000bp连接到pdm4并转入到s17-1中 在做接合实验中 供体菌耐Cm 受体菌耐N 双抗板上长出了菌 之后用只含N的LB摇单菌 并转移到20%蔗糖板上 过夜后 将单菌分别在Cm N两种板上筛选 取只在N上的菌进行pcr鉴定 共鉴定了81个菌 都没有那2000bp的片段 不确定双交换是否是在双抗板上已经完成？因为怀疑摇菌那一步把质粒丢了 所以没办法在蔗糖板上完成第二次交换？谢谢各位

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1楼 2018-03-10 21:20:52
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喵喵喵呀

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by summuryi at 2018-03-10 21:20:52
在做基因敲除 已将目的基因上下游共2000bp连接到pdm4并转入到s17-1中 在做接合实验中 供体菌耐Cm 受体菌耐N 双抗板上长出了菌 之后用只含N的LB摇单菌 并转移到20%蔗糖板上 过夜后 将单菌分别在Cm N两种板上筛选 取只 ...

同学，你好，我最近也在做同源重组的单交换筛选，请问你的问题解决了吗
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2楼2018-08-29 20:52:29
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MAIT

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 喵喵喵呀 at 2018-08-29 20:52:29
同学，你好，我最近也在做同源重组的单交换筛选，请问你的问题解决了吗...

前辈  你解决了吗？求指教
赞一下 回复此楼
3楼2022-05-28 13:41:09
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