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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请教各位----做液相色谱遇到的困惑！
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

[交流] 请教各位----做液相色谱遇到的困惑！

我做的是反相高效液相，最近发现一个很奇怪的现象，我的样品在甲醇下的溶解度比较好，但是在甲醇和水混合的溶液中就会出现混浊感觉就像产生沉淀一样，在梯度洗脱100%水~100%甲醇时我用甲醇溶解的样品进样，超纯水带进去样品后会不会在管路里产生这种现象而把管路和柱头堵塞。
恳请各位高手指点
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1楼 2009-03-12 17:43:19
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licunyuok

木虫 (小有名气)
★ ★
jsys(金币+2):感谢参与！
可以放心，你用的是梯度洗脱100%水~100%甲醇，整个流动相把在管道里析出来的那部分样品可以洗干净！只要不出现鬼峰就好，常常注意系统的工作状态，才能保证少出现问题！
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2楼2009-03-12 18:33:44
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zf851

金虫 (小有名气)
★ ★
jsys(金币+2):感谢参与！
从100%水开始么？ 兄弟 你的柱子是水相柱么
好像不用有机溶剂走 基线很难平衡的 而且一般的C-18柱老用这么高比例的水跑，用不了多久柱头就得塌掉的啊？你的东西是只要有一点水存在就会是 乳浊状的么？还是你用来溶解样品的 有机+水相 调的极性偏高了啊？
没把情况说太明白啊
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3楼2009-03-12 19:33:04
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linda1934

木虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1):感谢参与！
梯度洗脱100%水~100%甲醇，这么表达可不像个做实验的人该有的，表述不清。不过应该是不会堵柱子的
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4楼2009-03-12 19:57:04
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留驻的河

银虫 (小有名气)
★
jsys(金币+1):感谢参与！
峰应该会变形
使柱效降低
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5楼2009-03-12 22:26:30
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lanlan1119

金虫 (小有名气)
峰有点拖尾，我用的是waters600，柱子是买仪器的时候配的，Nova-pak HR-C18柱，全部水相能走平衡。这边连个教用仪器的都没有我来之前基本没人用HPLC，一直都是自己摸索，所以用了这么长时间还是个菜鸟
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6楼2009-03-13 08:57:37
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ljh616528

金虫 (正式写手)
缩短下梯度范围呢
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平安是福
7楼2009-03-13 14:18:24
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)
梯度可以修改一下,你可以用20%甲醇开始梯度,
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8楼2009-03-13 14:35:00
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lanlan1119

金虫 (小有名气)
这是我做的色谱图，色谱条件：流动相乙腈和水
         0~5min   0.2ml/min           0%乙腈
         5~10min  0.2~0.4 ml/min    0%乙腈~10%乙腈+90%水
         10~28min 0.4~0.8 ml/min      10%乙腈~100%乙腈
前面两个峰分不开，前两天去做了个气质连用，里面有DMSO和二甲基砜，还有另外两个样品出来结构了，其余都没有汽化。前面没有分开的两个峰会不会是
DMSO和二甲基砜呢。因为我过硅胶柱上样的时候加了些DMSO溶解样品（可能加的有点多，后来才知道这东西旋蒸时不好除去）。请各位高手指点！
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9楼2009-03-13 17:10:38
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lanlan1119

金虫 (小有名气)
各位高手快点帮忙啊，下周就要去做质谱了，不知道前面两个峰分成这样子能不能做啊？
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10楼2009-03-13 19:59:11
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