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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒单酶切和双酶切一样有两条带，位置还差不多，求问这正确吗
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Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)

[交流] 质粒单酶切和双酶切一样有两条带，位置还差不多，求问这正确吗 已有1人参与

为什么我对质粒（pMD18-T+目的基因）进行单酶切和双酶切出来，跑电泳。泳道下面都是两条带且位置差不多，单酶切是不是应该只有一条带啊？
注：单酶切我做了6组30min-3h，梯度为30min，条带结果一样，避免了没切完全的因素。请大家帮帮忙，十分感谢！为了后续做连接转化的
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1楼 2018-03-07 21:41:34
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杨娟

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
单酶切出来两条带说明在你的质粒上应该有不止一个酶切位点，在酶切之前确定质粒上你所用的酶切位点有几个，以及先考虑好单酶切后会出现几种情况

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2楼2018-03-08 15:36:26
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Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 杨娟 at 2018-03-08 15:36:26
单酶切出来两条带说明在你的质粒上应该有不止一个酶切位点，在酶切之前确定质粒上你所用的酶切位点有几个，以及先考虑好单酶切后会出现几种情况

您好，我忘了说我的目的片段加了酶切位点的，和T载体上的酶切位点一样。这样的话，切出来两条是正确的吗？
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3楼2018-03-09 13:53:32
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