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Deam铁杆木虫 (著名写手)
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DEAE-Sephadex A-25预处理方法 已有1人参与
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我想用DEAE-Sephadex A-25的葡聚糖凝胶树脂，用来分离我的产品，因为第一次做，完全没有经验，有一些问题想求助下大家。 关于DEAE A-25如何预处理，我在网上查过，方法如下： DEAE-Sephadex A-50(下称A-50)5克，悬于500ml蒸馏水，1小时后倾去上层细粒。按每克A-50加 0.5N NaOH 15ml的比例，将A-50浸泡于0.5N NaOH中，搅匀，静置30分钟，装入布氏漏斗(垫有2层滤纸)中抽滤，并反复用蒸馏水抽洗至PH呈中性；再以0.5N HCl同上操作过程处理，最后以0.5N NaOH再处理一次。处理完后，将A-50浸泡于 0.1M，PH 7.4 PB中过夜。 我是加水后使用磁子搅拌48小时，后面用布氏漏斗抽滤发现很难抽滤。接着用0.5N NaOH加磁子搅拌1小时，发现用布氏漏斗特别特别难抽滤！！！ 不知道大家用的时候有没有这个问题，是怎么处理的？是不是不可以加磁子搅拌？十分谢谢！@cgjlove@sugz@幸福的柴门 |
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Deam: 金币+50, ★★★★★最佳答案 2018-03-08 06:42:36
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凝胶都是毫米级的小球，吸水后膨胀，最怕积压和碰撞，这样会导致小球破裂，有很多碎片， 而且影响填料的效率。 方法里面说了，浸泡就可以了，最多就是玻璃棒去搅拌几下，怎么能磁子搅拌，如果是极低速还能接受， 既然已经是这样了，建议用纱布过滤，把那些碎裂的过滤掉。 |
2楼2018-03-07 13:47:21
Deam
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