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Deam

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] DEAE-Sephadex A-25预处理方法 已有1人参与

我想用DEAE-Sephadex A-25的葡聚糖凝胶树脂,用来分离我的产品,因为第一次做,完全没有经验,有一些问题想求助下大家。
关于DEAE A-25如何预处理,我在网上查过,方法如下:
DEAE-Sephadex A-50(下称A-50)5克,悬于500ml蒸馏水,1小时后倾去上层细粒。按每克A-50加 0.5N NaOH 15ml的比例,将A-50浸泡于0.5N NaOH中,搅匀,静置30分钟,装入布氏漏斗(垫有2层滤纸)中抽滤,并反复用蒸馏水抽洗至PH呈中性;再以0.5N HCl同上操作过程处理,最后以0.5N NaOH再处理一次。处理完后,将A-50浸泡于 0.1M,PH 7.4 PB中过夜。
我是加水后使用磁子搅拌48小时,后面用布氏漏斗抽滤发现很难抽滤。接着用0.5N NaOH加磁子搅拌1小时,发现用布氏漏斗特别特别难抽滤!!!
不知道大家用的时候有没有这个问题,是怎么处理的?是不是不可以加磁子搅拌?十分谢谢!@cgjlove@sugz@幸福的柴门
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zinfly

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
Deam: 金币+50, ★★★★★最佳答案 2018-03-08 06:42:36
凝胶都是毫米级的小球,吸水后膨胀,最怕积压和碰撞,这样会导致小球破裂,有很多碎片,
而且影响填料的效率。
方法里面说了,浸泡就可以了,最多就是玻璃棒去搅拌几下,怎么能磁子搅拌,如果是极低速还能接受,
既然已经是这样了,建议用纱布过滤,把那些碎裂的过滤掉。
2楼2018-03-07 13:47:21
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Deam

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zinfly at 2018-03-07 13:47:21
凝胶都是毫米级的小球,吸水后膨胀,最怕积压和碰撞,这样会导致小球破裂,有很多碎片,
而且影响填料的效率。
方法里面说了,浸泡就可以了,最多就是玻璃棒去搅拌几下,怎么能磁子搅拌,如果是极低速还能接受,
...

再请问下 像DEAE A-25这种弱阴离子树脂 是不是按 碱 酸 碱的顺序预处理啊?

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-03-08 12:38:06
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Deam at 2018-03-08 12:38:06
再请问下 像DEAE A-25这种弱阴离子树脂 是不是按 碱 酸 碱的顺序预处理啊?
...

http://www.solarbio.com/article-516.html
千万记住不要破坏凝胶颗粒,可以考虑水泵脱气泡,
就是在大干燥器里面,抽真空1h。
4楼2018-03-10 13:31:27
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