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zls2011

铁虫 (小有名气)

[求助] 包涵体形成原因

本人在异源表达蛋白质,方法为IPTG诱导浓度0.2mM,表达的蛋白质一直不溶解于buffer,在沉淀中。但最近一次发现蛋白在溶液中,重复又无法重复。求助蛋白表达包涵体的关键影响因素!
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每天都是好日子,珍惜拥有的。
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
zls2011: 金币+2, 有帮助 2018-04-12 15:18:22
会不会是宿主菌不同
2楼2018-03-06 16:28:32
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talSDU

新虫 (初入文坛)

影响包涵体形成的因素主要有温度,培养基,ph等,建议低温诱导,并使用营养丰富的培养基。如果是原核蛋白,建议同源表达

发自小木虫Android客户端
3楼2018-03-08 11:33:10
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一米吃苹果

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zls2011: 金币+5, 博学EPI+1, 有帮助 2018-04-12 15:18:04
蛋白表达包涵体一般影响因素是表达温度和诱导剂浓度。如果改变这些都没什么作用的话,那就尝试融合蛋白【MBP GST】吧,或者和Chaperone一起表达吧
4楼2018-03-11 09:41:12
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