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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » TaKaRa taq 酶扩增不出条带
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欧白鼠

新虫 (初入文坛)

[求助] TaKaRa taq 酶扩增不出条带

使用TaKaRa taq酶总是扩增不出目的条带，只有引物二聚体。相同的东西同事可以扩增出来。不知道哪里出了问题，之前都是使用mix扩增的，现在是自己配的。不知普通pcr加样过程中可能会有哪一步导致扩增失败？配制的成分都没有少加。求助！

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1楼 2018-03-03 02:09:18
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)
你应该把你的加的组分列出来

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2楼2018-03-03 07:42:48
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欧白鼠

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 沉默的独角兽 at 2018-03-03 07:42:48
你应该把你的加的组分列出来

什么意思？单加吗？

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3楼2018-03-03 10:10:11
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-15 07:56:07
mix只要有特殊结构一般是p不出来的，直接用extaq无脑p

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做基因修饰的老菜鸡
4楼2018-03-03 12:17:26
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欧白鼠

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ken19860823 at 2018-03-03 12:17:26
mix只要有特殊结构一般是p不出来的，直接用extaq无脑p

关键是我同事能扩增出来，他说要少震荡，我按他说的做，还是p不出来。我今天把水，引物和dna与其他的成分分开加试了一下，还不知道结果怎么样。

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5楼2018-03-03 13:36:58
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 欧白鼠 at 2018-03-03 10:10:11
什么意思？单加吗？
...

是把你具体做法说一下，你这么说没有人能知道哪里有问题，我们看到的是我没做错，这个pcr太拧了，就是不出来

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6楼2018-03-03 21:48:36
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糖果，?

新虫 (初入文坛)
退火温度不合适

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7楼2018-05-14 22:16:45
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