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派大菁

新虫 (初入文坛)

[求助] 96孔板分离培养微生物的问题

论坛里的各位大神好,我是做植物内生菌分离纯培养的。
之前一直使用的都是最传统的划线分离最后移入试管斜面保存的办法。很费事费力。
后来看到了白洋组2015年发表在nature上的 (2015) Functional overlap of the Arabidopsis leaf and root microbiotas. Nature 528, 364-369.文章
他使用了limiting dilution梯度稀释法,用96孔板分离土壤微生物
但是他的文章中关于具体的操作细节写的不是很清楚

想请问有没有使用过这个办法的大神
这种办法是将植物组织研磨液梯度稀释之后,在液体培养基里培养,然后再将菌液梯度稀释加入96孔板?
还是按照他文中很少的一段描述For limiting dilution, homogenized roots from each root pool were sedimented for 15 min and the supernatant was
empirically diluted, distributed and cultivated in 96-well microtitre plates。

希望有前辈能指导一下我,非常感谢
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孝直

新虫 (初入文坛)

2楼2019-11-07 12:16:06
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