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unciawang

金虫 (正式写手)

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细胞划痕实验迁移率怎么计算？

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1楼2018-03-01 09:31:33

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呆呆向前看

铁虫 (小有名气)

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专业: 神经生物学

【答案】应助回帖

一.准备：
所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）

二.流程：
1.先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2.在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3.第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4.用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。
5.放入37度5%CO2培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照
（来源丁香通）