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plwwgk

新虫 (小有名气)

[交流] 求助这句关于慢病毒转染的英文怎么翻译

exogenously introduce IDH1/2 gain-of-function mutations into the xxx cell lines using lentivirus technology.
我不太理解的是怎么用慢病毒引入这个基因突变细胞模型,抱歉我不是学生物出身,不太懂这方面,麻烦可以详细解答一下吗?谢谢!

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GRUBBY_WU

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用lentivirus筛选细胞稳定系。lentivirus转染是稳定转染,可以将IDH1/2突变型整合到细胞基因组上稳定表达,lentivirus分可诱导和非可诱导,顾名思义,可诱导需要诱导表达,比如Tet-inducible shRNA的pTRIPZ和非可诱导的pGIPZ。相比瞬时转染,普通质粒整合到基因组上的几率很小,不用抗性筛选的情况下,细胞传几次代就没了。

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2019更好更棒!
2楼2018-02-26 09:30:00
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plwwgk

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2018-02-26 09:30:00
用lentivirus筛选细胞稳定系。lentivirus转染是稳定转染,可以将IDH1/2突变型整合到细胞基因组上稳定表达,lentivirus分可诱导和非可诱导,顾名思义,可诱导需要诱导表达,比如Tet-inducible shRNA的pTRIPZ和非可诱 ...

太感谢啦,能再问一句,对于一个没病毒转染基础的人,做出来这个模型大概需要多久?

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3楼2018-02-26 09:56:45
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

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引用回帖:
3楼: Originally posted by plwwgk at 2018-02-26 09:56:45
太感谢啦,能再问一句,对于一个没病毒转染基础的人,做出来这个模型大概需要多久?
...

建议1:经得起折腾的细胞系,就用质粒做瞬转,用抗性晒,g418、puro等,看载体,正常做下来1-2个月能得到稳定细胞株,提前是载体已建好。
建议2:讲真,不差钱的实验室建议外包做吧,实验室没有成套体系,做包装病毒都难,真的费时费力费钱,外包公司我就不安利了,一大堆

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2019更好更棒!
4楼2018-02-26 10:26:38
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plwwgk

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2018-02-26 10:26:38
建议1:经得起折腾的细胞系,就用质粒做瞬转,用抗性晒,g418、puro等,看载体,正常做下来1-2个月能得到稳定细胞株,提前是载体已建好。
建议2:讲真,不差钱的实验室建议外包做吧,实验室没有成套体系,做包装病 ...

哦哦,我是到国外做,不知道国外实验室会不会交给公司做,现在只是在做计划,因为出国时间有限,谢谢啦

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5楼2018-02-26 11:17:16
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