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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 质粒提取
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吉祥宝宝~

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取 已有3人参与

如何提取得到高浓度的质粒，用于后期基因转化实验~

@hc-material @gyesang 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2018-02-25 09:25:55
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
加多一些细胞，充分裂解细胞

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你好
2楼2018-02-25 09:28:08
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是转染吧？以高拷贝质粒为例，小提试剂盒5ml菌液正常能达到300ng/ul，60-80ul的量。大抽试剂盒250ml菌液浓度能达到600-1000ng/ul。
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2019更好更棒!
3楼2018-02-25 13:12:34
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阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用质粒大提试剂盒按流程提取，按您的需求选择一般的还是去内毒素的即可。
赞一下 回复此楼
总会出现一个温柔的人，让你变得温暖，然后默默离开。
4楼2018-02-25 14:27:03
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yuerh

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
增大菌液的浓度吧，也就是多一些细胞。然后按质粒提取试剂盒的说明来。
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5楼2018-02-25 16:20:03
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匿名

用户注销 (初入文坛)
本帖仅楼主可见
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6楼2018-03-01 12:58:10
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
引用回帖:
6楼: Originally posted by 少年pi at 2018-03-01 12:58:10
请问裂解细胞的时长多少合适呢？今天裂解了2min，提取出的质粒浓度不太高，大概有500多不到600。裂解时间长又担心破坏质粒。望赐教。
...

啥浓度单位是什么，如果500-600ug/ul很高了好吧，你想要多少。。。

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你好
7楼2018-03-02 09:02:04
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
引用回帖:
7楼: Originally posted by 1006641214 at 2018-03-02 09:02:04
啥浓度单位是什么，如果500-600ug/ul很高了好吧，你想要多少。。。
...

ng/ul

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你好
8楼2018-03-02 09:04:05
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