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linxi8579

铜虫 (正式写手)

[求助] 透析蛋白沉淀 已有1人参与

请教各位大侠蛋白透析的问题,我真核细胞表达的蛋白,使用his标签纯化后进行透析,透析液使用2 mM PBS pH 7.2,预测蛋白等电点5.67。透析后有大量蛋白沉淀析出。请教各位大侠如何来优化避免太多的蛋白沉淀析出呢?非常感谢。
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qpeng1983

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
linxi8579: 金币+5 2018-02-24 13:39:28
我觉得是不是透析后的体系导致的蛋白沉淀,可以调整下透析前的体系,或者添加一些保护剂什么的。
2楼2018-02-24 11:42:52
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qpeng1983 at 2018-02-24 11:42:52
我觉得是不是透析后的体系导致的蛋白沉淀,可以调整下透析前的体系,或者添加一些保护剂什么的。

您说的调整体系是指调整透析液成分还是蛋白溶液,具体如何调整能否给些建议
3楼2018-02-24 13:40:44
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qpeng1983

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by linxi8579 at 2018-02-24 13:40:44
您说的调整体系是指调整透析液成分还是蛋白溶液,具体如何调整能否给些建议...

调整一下蛋白溶液的体系。具体要实验一下看。
4楼2018-02-24 14:24:17
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qpeng1983 at 2018-02-24 14:24:17
调整一下蛋白溶液的体系。具体要实验一下看。...

好的,多谢
5楼2018-02-24 15:33:48
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zgy272

木虫 (正式写手)

逐步降低透析液浓度,逐步透析 4℃条件下
6楼2018-02-27 12:00:07
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