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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 福林酚法测多肽含量线性不好？
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goodboy520

铜虫 (小有名气)

[交流] 福林酚法测多肽含量线性不好？

标准曲线的制备 精密移取对照液0.0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml，分别置于具塞试管中，各加水至1ml，再分别加入碱性铜试液0.1ml，摇匀，各加入福林酚试液（取福林试液中的储备液1-16）4.0ml，立即混匀，置55摄氏度  水浴中准确反应5分钟， 后于冷水浴中10分钟，照分光光度法，在650nm的波长处测定吸光度。
      曲线线性就是达不到要求，大家有没做过，指导下，不胜感激！

[ Last edited by goodboy520 on 2009-3-10 at 09:21 ]
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学海无涯
1楼 2009-03-10 09:00:25
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍
★ ★
karl2100(金币+2,VIP+0):多谢指教！ 3-10 13:28
LZ的方法应该不成问题，我分析造成线性不好的原因可能有下面几种：
1.对反应时间、反应温度的控制环节没掌握好；
2.样品测定时间的间隔没控制好；（这点很重要，显色反应一般在测定过程中会造成吸光度的波动）
3.紫外的调试（自调零即及其调零、空白调零等）

我想严格控制上述条件的话，应该会成良好的线性。如果线性仍不好，LZ 可能要换另外的含量测定方法了。

别泄气，紫外本身就是比较麻烦的含测方法，LZ 加油！
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2楼2009-03-10 10:35:20
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goodboy520

铜虫 (小有名气)
谢谢！我在想是不是试剂问题，我们的福林酚试剂是从药检所买的，1到16稀释
或是对照曲线浓度太低了？
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学海无涯
3楼2009-03-10 11:15:03
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍
★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 3-10 21:03
LZ可以做个样品在全波长扫描下啊，一方面能确定最大吸收峰（可能与文献报道有点区别的哦），另一方面能确定标准品的曲线范围。
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4楼2009-03-10 11:17:07
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goodboy520

铜虫 (小有名气)
谢谢，能不能帮忙查下吸光度值大概多少？
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学海无涯
5楼2009-03-10 11:39:57
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 3-11 00:44
文献报道多肽含量测定比较少，看到一篇波长是“278nm”，LZ还是试下全波长扫描吧，不用看文献即能看出是否有最大吸收及最大吸收波长。
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6楼2009-03-10 11:54:24
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