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CC-sysu

新虫 (初入文坛)

[求助] CORTECS HILIC堵?已有3人参与

waters的CORTECS HILIC柱子;进标准品的时候没问题;但进了五个样品后柱子压力突然就下不去了,是因为堵了吗?用50%乙腈水冲洗,压力出现如图的反复情况。
(样品:溶藻弧菌,用50%乙腈水溶液超声破碎处理后高速离心得上清;柱子压力未经样品前95%乙腈6000psi,40%乙腈9000psi;水相是5mM乙酸铵)

CORTECS HILIC堵?


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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by CC-sysu at 2018-02-07 00:35:36
1.进样前用12500rpm 10min离心了两次,所以这个问题应该可以排除;会是因为溶藻弧菌的问题吗?
2.至于说的ftn还是fl我具体不太清楚,得明天去看一下仪器;但是这边的色谱进样是直接连了质谱,没有接六通阀,那还有 ...

噢,样品前处理暂时可以不考虑了。iclass进样不可能不通过六通阀,流动相从你的二元泵(就是bsm)过来,先到六通阀的5#位,如果你是进样器的型号是ftn,就走4#位,如果是fl进样器,就走6#位。型号看进样器前面。

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7楼2018-02-07 07:12:44
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

你离心的转速是多少?对于uplc,之前一万转10分钟或者0.2微米滤膜过滤。你的这个iclass是ftn还是fl进样器,如果是ftn进样器,把六通阀的5#和6#位用双接在一起,如果压力还是高,就是柱子堵了。如果压力恢复,那就是needle seal或者针堵了。个人觉得,ftn堵的概率更大。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2018-02-06 21:33:38
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michaelbi

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by CC-sysu at 2018-02-07 00:37:50
反冲是指正常装柱的方向反过来吗?之前有看到过但没有试过~~
流动相比例该如何控制?反冲对柱子会有伤害吗?
谢谢!
...

就是用洗脱的流动相就行,也可以用纯有机相。

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8楼2018-02-07 22:28:16
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junly-7

新虫 (正式写手)

HILIC柱,好像是水相不能超过60吧,你可以把柱子前端那个在线过滤器拆下来把里面的滤芯换了或者超声清洗一下,看压力会不会低一点

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9楼2018-04-09 23:09:20
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zds316

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2018-02-06 21:33:38
你离心的转速是多少?对于uplc,之前一万转10分钟或者0.2微米滤膜过滤。你的这个iclass是ftn还是fl进样器,如果是ftn进样器,把六通阀的5#和6#位用双接在一起,如果压力还是高,就是柱子堵了。如果压力恢复,那就是 ...

柱子拆下来一样看看系统压力也就知道是不是柱子堵了
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=3133586
10楼2018-04-27 11:02:40
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普通回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

之前=至少,写错了,哈哈

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3楼2018-02-06 21:34:21
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michaelbi

铁杆木虫 (正式写手)

柱子堵的话,可以反冲试试

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2018-02-07 00:06:02
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CC-sysu

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2018-02-06 21:33:38
你离心的转速是多少?对于uplc,之前一万转10分钟或者0.2微米滤膜过滤。你的这个iclass是ftn还是fl进样器,如果是ftn进样器,把六通阀的5#和6#位用双接在一起,如果压力还是高,就是柱子堵了。如果压力恢复,那就是 ...

1.进样前用12500rpm 10min离心了两次,所以这个问题应该可以排除;会是因为溶藻弧菌的问题吗?
2.至于说的ftn还是fl我具体不太清楚,得明天去看一下仪器;但是这边的色谱进样是直接连了质谱,没有接六通阀,那还有ftn或fl的问题吗?
3.图片所示的压力浮动并没有进样,只是直接用水和乙腈冲柱子所反映的压力变化值。
麻烦您了!

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5楼2018-02-07 00:35:36
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CC-sysu

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by michaelbi at 2018-02-07 00:06:02
柱子堵的话,可以反冲试试

反冲是指正常装柱的方向反过来吗?之前有看到过但没有试过~~
流动相比例该如何控制?反冲对柱子会有伤害吗?
谢谢!

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6楼2018-02-07 00:37:50
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