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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA琼脂糖电泳4%
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悟空爱八戒

新虫 (初入文坛)
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DNA琼脂糖电泳4%
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如题，如果想分离相差十几bp的DNA片段，用4%的琼脂糖电泳，电压为多少伏？

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1楼 2018-02-05 14:38:43
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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drwhoknowss: 金币+3, 有理有据 2018-02-06 11:44:11
首先，4%的琼脂糖很难制胶，我做过最大2.5%（区分57bp）。其次，就算4%的琼脂糖不一定能区分开十几bp的DNA片段，而且你的片段越大更难区分。

片段500bp以内，相差20bp左右的片段，建议跑8-10%非变性聚丙烯胺酰胺（native-PAGE）凝胶电泳试试。
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悟空爱八戒
8楼2018-02-05 15:21:10
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悟空爱八戒

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2018-02-05 15:21:10
首先，4%的琼脂糖很难制胶，我做过最大2.5%（区分57bp）。其次，就算4%的琼脂糖不一定能区分开十几bp的DNA片段，而且你的片段越大更难区分。

片段500bp以内，相差20bp左右的片段，建议跑8-10%非变性聚丙烯胺酰胺 ...

谢谢！我看日本人说用过4%的胶区分相差十几bp的，所以自己就打算用这个尝试，但是电压用了50伏，marker跑不开。

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9楼2018-02-05 16:55:28
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eagle00768

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
跑过4%的，200V左右，跑时间长一点，半小时左右。

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悟空爱八戒
10楼2018-02-05 19:27:05
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悟空爱八戒

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by eagle00768 at 2018-02-05 19:27:05
跑过4%的，200V左右，跑时间长一点，半小时左右。

你是做过200V吗，我之前用50V,跑了一个多小时，marker都跑不开。

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11楼2018-02-05 20:07:38
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
page胶做这个轻松。

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12楼2018-02-06 08:14:32
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eagle00768

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 悟空爱八戒 at 2018-02-05 20:07:38
你是做过200V吗，我之前用50V,跑了一个多小时，marker都跑不开。
...

对，用过，时间长点能跑开。
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13楼2018-02-08 23:33:42
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褚楚2楼
2018-02-05 14:40   回复  
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甄士隐2073楼
2018-02-05 14:40   回复  
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yh05044楼
2018-02-05 14:42   回复  
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0918200535楼
2018-02-05 14:43   回复  
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ok123156楼
2018-02-05 14:46   回复  
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terry17897楼
2018-02-05 14:47   回复  
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