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悟空爱八戒

新虫 (初入文坛)


已领完
DNA琼脂糖电泳4%
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如题,如果想分离相差十几bp的DNA片段,用4%的琼脂糖电泳,电压为多少伏?

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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+3, 有理有据 2018-02-06 11:44:11
首先,4%的琼脂糖很难制胶,我做过最大2.5%(区分57bp)。其次,就算4%的琼脂糖不一定能区分开十几bp的DNA片段,而且你的片段越大更难区分。

片段500bp以内,相差20bp左右的片段,建议跑8-10%非变性聚丙烯胺酰胺(native-PAGE)凝胶电泳试试。

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8楼2018-02-05 15:21:10
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悟空爱八戒

新虫 (初入文坛)


送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2018-02-05 15:21:10
首先,4%的琼脂糖很难制胶,我做过最大2.5%(区分57bp)。其次,就算4%的琼脂糖不一定能区分开十几bp的DNA片段,而且你的片段越大更难区分。

片段500bp以内,相差20bp左右的片段,建议跑8-10%非变性聚丙烯胺酰胺 ...

谢谢!我看日本人说用过4%的胶区分相差十几bp的,所以自己就打算用这个尝试,但是电压用了50伏,marker跑不开。

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9楼2018-02-05 16:55:28
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eagle00768

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
跑过4%的,200V左右,跑时间长一点,半小时左右。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2018-02-05 19:27:05
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悟空爱八戒

新虫 (初入文坛)


送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by eagle00768 at 2018-02-05 19:27:05
跑过4%的,200V左右,跑时间长一点,半小时左右。

你是做过200V吗,我之前用50V,跑了一个多小时,marker都跑不开。

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11楼2018-02-05 20:07:38
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ken19860823

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
page胶做这个轻松。

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12楼2018-02-06 08:14:32
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eagle00768

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 悟空爱八戒 at 2018-02-05 20:07:38
你是做过200V吗,我之前用50V,跑了一个多小时,marker都跑不开。
...

对,用过,时间长点能跑开。
13楼2018-02-08 23:33:42
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褚楚2楼
2018-02-05 14:40   回复  
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2018-02-05 14:40   回复  
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yh05044楼
2018-02-05 14:42   回复  
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0918200535楼
2018-02-05 14:43   回复  
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ok123156楼
2018-02-05 14:46   回复  
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terry17897楼
2018-02-05 14:47   回复  
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