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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为什么PCR后没条带？ 急！
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虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] 为什么PCR后没条带？ 急！

基因组条带清晰，但PCR无条带。怀疑PCR各成分和引物有问题，但用别人的模板DNA由可以扩出条带。请教各位同仁，这是什么原因？谢谢支招！
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1楼 2009-03-06 17:52:36
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★
sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
建议调整一下模板量和镁离子浓度
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2楼2009-03-06 19:35:08
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qingxiong

木虫 (正式写手)
★
sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
建议改变一下退火温度和增加模板量
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3楼2009-03-06 20:32:38
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wmjiang

银虫 (小有名气)
★
sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
再P
有时扩不出来，很多原因，PCR仪等
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4楼2009-03-06 22:23:17
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panqiuzhen

为什么PCR后没条带？ 急！

★
sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
问题及有可能出在你的DNA模板上了。
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5楼2009-03-07 09:47:51
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sail000000

铜虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励新虫~ 3-10 21:23
你可能还没找对PCR条件，如果新的引物很可能是退火温度没找对，如果是已经成熟的条件的话很可能是你的模板出问题了！
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6楼2009-03-07 18:39:38
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)
很有可能是模板有问题，模板量可以重新优化调整一下，另外你的模板是什么材料，会不会含有抑制酶活性的东西？
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7楼2009-03-09 11:17:56
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rszhang

铁杆木虫 (正式写手)
换个引物看看。
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8楼2009-03-10 21:02:09
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
调整一下模板，我以前也出现过这样的问题，另外，加模板的时候先混匀一下。
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9楼2009-03-10 23:01:26
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fraser

银虫 (正式写手)
楼主，基因组提取时某些物质可能引起酶失活，如果是血样的话是里面的抗凝剂是会让酶失活的。
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10楼2009-03-11 07:26:00
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