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虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] 为什么PCR后没条带? 急!

基因组条带清晰,但PCR无条带。怀疑PCR各成分和引物有问题,但用别人的模板DNA由可以扩出条带。请教各位同仁,这是什么原因?谢谢支招!
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
建议调整一下模板量和镁离子浓度
2楼2009-03-06 19:35:08
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qingxiong

木虫 (正式写手)


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
建议改变一下退火温度和增加模板量
3楼2009-03-06 20:32:38
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wmjiang

银虫 (小有名气)


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
再P
有时扩不出来,很多原因,PCR仪等
4楼2009-03-06 22:23:17
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panqiuzhen

为什么PCR后没条带? 急!


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-7 10:26
问题及有可能出在你的DNA模板上了。
5楼2009-03-07 09:47:51
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sail000000

铜虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励新虫~ 3-10 21:23
你可能还没找对PCR条件,如果新的引物很可能是退火温度没找对,如果是已经成熟的条件的话很可能是你的模板出问题了!
6楼2009-03-07 18:39:38
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)

很有可能是模板有问题,模板量可以重新优化调整一下,另外你的模板是什么材料,会不会含有抑制酶活性的东西?
7楼2009-03-09 11:17:56
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rszhang

铁杆木虫 (正式写手)

换个引物看看。
8楼2009-03-10 21:02:09
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

调整一下模板,我以前也出现过这样的问题,另外,加模板的时候先混匀一下。
9楼2009-03-10 23:01:26
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fraser

银虫 (正式写手)

楼主,基因组提取时某些物质可能引起酶失活,如果是血样的话是里面的抗凝剂是会让酶失活的。
10楼2009-03-11 07:26:00
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