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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 实验设计请教
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loveedward

银虫 (小有名气)

[交流] 实验设计请教

我们实验室自己的一株菌能够催化OPBE还原，催化羰基的还原反应。我想把这个酶克隆出来，请教高手能不能给点建议啊！如何设计引物把基因调出来。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-13 at 12:01 ]
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1楼 2009-03-06 14:57:20
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sunyucheng

铜虫 (初入文坛)
★
350784478(金币+1,VIP+0):感谢提供答案 10-13 12:01
最直接的方法：从GenBank中调出多个菌株或其他催化OPBE还原的酶的核苷酸序列，进行同源性比较，根据序列的保守性设计兼并引物，扩增你的菌株的基因组DNA，获得部分片段后，再应用反向PCR获得该酶的全部编码框序列及两端的调控序列。
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2楼2009-03-07 09:26:39
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