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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 想给我的目的蛋白加上His标签，该加在哪里？
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971849652xj

新虫 (初入文坛)

[求助] 想给我的目的蛋白加上His标签，该加在哪里？ 已有1人参与

载体是pPIC9K，没有his标签，想在蛋白上加上组氨酸标签，送给南京金斯瑞做。他把his标签加在ATG和目的基因之间。师兄们说加错了，应该加在酶切位点前面，因为pPIC9K自己有ATG，加在酶切位点前面可以表达的。打给金思瑞，他们依然说应该加在ATG和目的基因之前。请问有人这样加过么?可以挂上镍柱么？蛋白表达了，但是酶活很低，应该是his标签导致的。
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1楼 2018-02-01 21:19:20
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gifted001

木虫 (著名写手)
his一般加在蛋白头或尾部啊加尾部常用，你这个是酵母表达载体吧甲醇诱导表达的吧

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2楼2018-02-01 23:29:31
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一米吃苹果

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们加His都是加在蛋白序列之前或者之后的，酶切位点之前，His和目的序列不能紧挨着，有可能会影响蛋白折叠的
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3楼2018-03-11 09:59:15
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